SÉANCE nu 2 MARS 363 



querce dosage, nous avons examiné les diverses méthodes alors connues . 

 L'expérience nous a montré que la combinaison de deux méthodes déjà 

 existantes, celle de Kiimagawa et Suto d'une part et celle de Windaus 

 d'autre part, doftne d'excellents résultats. 



On sait, en efifet, que la cholestérine peut se trouver, dans les liquides 

 et. les tissus de l'organisme sous forme libre, sous forme d'éthers, ou 

 encore sous forme de complexes avec les acides gras (comme ceux décrits 

 par Lorrain Smith, Powell, etc.). Il faut donc : I) extraire des tissus tous 

 les composés dans lesquels elle peut entrer; II) la libérer de tous ses 

 composés ; III) la doser totalement et ne doser qu'elle. On peut dire que 

 dans l'ensemble tous ces points étaient résolus antérieurement aux dis- 

 cussions qui viennent de s'élever. 



I et II. — Quand on veut extraire intégralement et libérer de leurs 

 combinaisons les substances insaponifiables dont la cholestérine fait 

 partie, deux cas peuvent se présenter : 



1° Méthode de saponification totale. — Les remarquables travaux de 

 Kumagawa et Suto (1) ont montré que la méthode la plus sûre pour 

 -extraire tous les acides gras et tout l'insaponifiable contenu dans un tissu 

 consiste à faire de celui-ci la destruction totale par les alcalis à chaud ; 

 puis les acides gras sont libérés par addition d'acide chlorhydrique. Par 

 agitation, on fait passer ces acides dans l'éther : l'insaponifiable s'y^ 

 dissout aussi. Les extraits éthérés réunis, évaporés, sont repris par 

 l'éther absolu, évaporés de nouveau, séchés, puis repris par Féther de 

 pétrole, filtrés sur amiante, évaporés, séchés. Le résidu contient, outre 

 les acides gras non volatils, tout l'insaponiable, donc toute la cho- 

 lestérine. 



:2° Extraction^ puis saponification. — Dans certains cas (sang défîbriné-, 

 globules), comme l'a montré Shimidzu (2), la méthode de saponification 

 totale ne peut pas donner d'emblée toutes les substances à doser. On agit 

 alors en deux temps: A. On fait d'abord une extraction alcoolique par 

 l'alcool bouillant. Cette extraction, impossible avec un Soxhlet ordinaire, 

 est facile si l'on emploie l'appareil que Kumagawa a spécialement cons- 

 truit pour cet objet. On obtient ainsi un extrait alcoolique que l'on 

 saponifie. B. Le tissu extrait par l'alcool est ensuite soumis à la saponi- 

 fication totale. Les deux extraits A et B réunis sont alors traités comme 

 dans la méthode précédente. Ici encore, on est sur d'obtenir toute la 

 cholestérine. 



(1) Muneo Kumagawa et Kenzo Suto. Ein neues Verfahren zur quantitativen 

 Bestimmung des Faites und der unverseifbaren Substanzen in Tierischen 

 Material, nebst der Ivritik einiger gebraiilichen Methoden. Biochemische Zeit- 

 schrift. vol. VIII, 1908, p. 212-347. 



(2) Yoshitaka Shimidzu. Ein Beitrag zur Kumagawa-Sutoschen Fettbestim- 

 mungs Méthode. Biochemische Zeitschrift, t. XX'VIII, 1910, p. 237-273. 



