SÉANCE DU 16 MARS 437 



nécessaire de ne mettre dans les réactifs que des fragments d'organes 

 de petites dimensions ne dépassant pas, par exemple, 8 millimètres de 

 long suri millimètres de large et 3 millimètres d'épaisseur. L'orienta- 

 tion de ces petits fragments ne présente aucune difficulté lorsqu'il s'agit 

 d'un foie ou d'une rate infectés par Leishmania Donovani; il n'en est 

 plus de même, lorsque l'on doit étudier un bouton d'Orient ou une 

 lésion analogue : les pièces doivent alors être prélevées à la périphérie 

 de l'ulcération et doivent comprendre toute l'épaisseur de la région 

 infiltrée du derme. 



Les inclusions à la celloïdine ne trouvent leurs indications que lors- 

 qu'on veut examiner des coupes d'ensemble du foie, de la rate, des 

 ganglions ou de la peau; en règle générale, il vaut mieux faire usage 

 des inclusions à la paraffine, qui permettent d'obtenir des coupes très 

 minces, où les Leishmania se colorent mieux. 



Lorsque les tissus contiennent un très grand nombre de parasites, 

 des méthodes de coloration très simples peuvent donner des résultats 

 satisfaisants : il en est ainsi dans les cas typiques de Kala-azar ou de 

 bouton d'Orient. La coloration banale par l'hémaléine-éosine y montre 

 de volumineux macrophages, bourrés de petits noyaux au voisinage 

 desquels se reconnaissent des centrosomes très foncés, piinctiformes ou 

 bacilliformes ; un tel aspect est typique, même si les contours des Leish- 

 mania ne sont pas visibles. Par contre, lorsqu'il n'existe que de rares 

 éléments parasités, ne contenant chacun qu'une ou deux Leishmania^ il 

 devient nécessaire d'obtenir des colorations plus électives. Pour y par- 

 venir, nous avons tout d'abord employé la coloration par la liqueur de 

 Giemsa, diluée à 1 p. 30, colorant dont nous prolongions l'action pen- 

 dant vingt-quatre heures; la différenciation était faite par l'alcool 

 absolu et l'essence de girofle. Puis, nous avons eu recours aux colora- 

 tions lentes par des dilutions étendues de bleu de Leishman, mais avec 

 différenciation par l'eau légèrement acétihée, puis par de l'eau contenant 

 une faible proportion de potasse (méthode de Leishman). Plus récem- 

 ment, nous avons fait usage des trois procédés que nous décrirons ci- 

 dessous : ce sont ces techniques que nous avons employées pour déceler 

 les Leishmania sur les coupes de la espundia du Pérou (1). 



Coloration par la thionine phéniquée. — Prolonger l'action de la thionine 

 phéniquée pendant une demi-heure; laver la coupe à l'eau distillée; déshy- 

 drater rapidement à ralcool absolu ; différencier longuement par Fesseuce 

 de girofle, puis par l'alcool absolu.; éclaircir au xylol. Le noyau et le centro- 

 some des Leishmania, colorés en bleu très foncé, se détachent nettement sur 

 le protoplasma des éléments qui restent à peine bleutés. Lorsque les Leish- 



(1) A. Laveran et Nattan-Larrier. A propos de la Espundia. Soc. de Path. 

 Exot., séance du 18 mars 1912. 



