SÉANCE DU 10 DÉCEMBRE 



peu appropriée à la purification des grandes quantités de glycogène. 

 Dans ce cas on se sert avec avantage de la seconde méthode de 

 Pfliïger (1). Elle comprend trois moments importants : a) Dissolution et 

 extraction du glycogène des tissus par l'eau à l'ébullition: b) Transfor- 

 mation des albumines en alcali-albumines par l'addition de KOH et 

 sensibilisation de la précipitabilité de glycogène par la présence de IK 

 dans le liquide; c) Précipitation avec une quantité donnée d'alcool à 

 95 degrés du glycogène seul de la solution mère. 



Pour se convaincre que les albumines ne précipitent pas, dans les 

 conditions de la méthode, on peut faire l'expérience suivante : On 

 dissout du blanc d'œuf dans 3 à 4 volumes d'eau; on filtre, et à 50 centi- 

 mètres cubes de cette solution on ajoute d'après la méthode 5 gramme- 

 de IK et 2,5 centimètres cubes de KOH à 60 p. 100. En ajoutant 25 cen- 

 timètres cubes d'alcool à 95 degrés à ce liquide on n'a pas de précipité. 

 Pour la préparation des grandes quantités de glycogène celte méthode 

 a l'inconvénient d'être coûteuse. Si on veut avoir rapidement des 

 grandes quantité de glycogène très purifié, on prend du glycogène 

 préparé par n'importe quelle méthode, ou du glycogène impur du 

 commerce; on le met en suspension environ à 10 p. 100 dans l'eau. Il 

 faut au moins vingt-quatre heures pour que le glycogène soit bien 

 disloqué par l'eau). Ensuite on le met à dialyser pendant quarante- 

 huit heures dans un dialyseur en viscose en changeant souvent l'eau. 

 Déjà après vingt-quatre heures un dépôt d'impuretés se fait au fond du 

 dialyseur. On décante, on filtre et on traite cette solution concentrée de 

 glycogène parla méthode de Pfluger-Nerking. Ainsi pour 120 grammes 

 de glycogène impur on n'aura besoin que de 30 grammes de IK. 

 Une fois le précipité recueilli, on le dissout dans le minimum d'eau: 

 on neutralise la solution avec l'acide acétique en dépassant légèrement 

 la neutralité, et on soumet le liquide à la dialyse pendant vingt- 

 quatre heures ou quarante-huit heures. 



La solution retirée du dialyseur est précipitée par un ou deux 

 volumes d'alcool à 95 degrés ; elle donne un glycogène déjà très 

 pur. On peut le purifier encore par une ou deux précipitations par 

 l'alcool. 



La purification peut être suivie au moyen de la conductibilité élec- 

 trique. J'ai obtenu des préparations dont la conductibilité pour une 

 concentration de 2 à 3 p. 100 était de 0,000056. 



D'autre part, en procédant à la dernière précipitation, on peut par une 

 série de précipitations fractionnées recueillir des lots de glycogène dont 

 la grosseur des granules est de plus en plus petite. On sait depuis les 



(1) ' Pfliïger-Xerking. Eine neue Méthode zur Bestimmung des Glycogeiies. 

 Pfliiger's Arch., Bd 76, s. 531-331, 1899. 



