SÉANCE DU 17 JANVIER 155 



Les observations de ces savants m'ont donné l'idée de rechercher les 

 causes d'apparition de la chlororaphine dans les cultures. Dans ce but, 

 j'ai réalisé, après de longs tâtonnements, un milieu chimiquement 

 défini où la Bactérie produit en un temps donné un poids maximum et à 

 peu près constant de matière verte. La composition de ce milieu est la 

 suivante (1). 



Eau, 100 gr. ; asparagine, 0,7; glycérine, 2,3; phosphate dipotassique, 0,1; sulfate 

 de magnésie, 0,5; chloi'ure de calcium, 0,04; sulfate feiTeux, 0,01. 



Tous les éléments minéraux et organiques sont nécessaires à la pro- 

 duction de la chlororaphine, mais je n'étudierai dans cette note que 

 rintluence du fer. Lorsqu'on réalise dans le milieu indiqué les condi- 

 tions optima d'aération et de température, le Bacille donne une culture 

 blanche ou jaunâtre à fluorescence faible ou nulle, avec voile épais et 

 production rapide de cristaux. Les doses de sulfate ferreux les plus 

 favorables sont de 4 à 12 milligrammes ; mais on peut les abaisser nota- 

 blement : ainsi, l'apport de 1 milligramme de sel de fer permet d'obte- 

 nir d'une façon constante la chlororaphine. On obtient encore quelques 

 cristaux en ajoutant milligr. 5; mais des quantités de fer inférieures 

 (Omilligr. 3) ne favorisent plus la production de la matière verte. 



On voit donc que la présence de sulfate ferreux dans un milieu défini 

 favorise la production de la substance cliromogène. Sous quel état agit 

 le fer? On peut constater que ce métal ajouté au milieu se précipite et 

 il ne reste en solutions que des doses très faibles insuffisantes pour 

 déterminer la formation régulière et abondante de la chlororaphine 

 (pour 10 milligrammes de sulfate ferreux, il ne reste que Omilligr. 030 

 à milligr. 040 de fer dissous). Il faut donc admettre que le fer préci- 

 pité dans le milieu agit favorablement- A l'appui de cette interpréta- 

 tion, il convient de noter que du fer se redissout peu à peu à mesure 

 que la végétation se poursuit dans les cultures. 



Le sulfate ferreux agit par sa base ; en efiFet, on peut remplacer ce sel 

 par le citrate ferreux ou le chlorure ferrique; néanmoins le sulfate 

 ferreux semble préférable. L'action du fer est spécifique: j'ai, en effet, 

 essayé sans succès le manganèse, le nickel, le cobalt, le zinc, le chrome 

 et le bore à des doses variant de 0,1 à 80 milligrammes. 



Nous avons vu que si l'on ajoute seulement 0,3 milligrammes de sul- 

 fate ferreux, il n'y a plus production de chlororaphine; ce fait tend déjà 

 à montrer que le fer est indispensable à la formation des cristaux. 

 D'autre part, si, à des cultures faites dans un milieu dépourvu de fer, on 

 ajoute cet élément après 1, 2, 3, 4 et 15 jours d'ensemencement, on 

 constate un regain de végétation et production de substance verte. Cet 



(i) On peut remplacer plus ou moins avantageusement l'asparagine par le 

 glycocoUe, l'urée, Tacide aspartique, lesuccinate d'ammoniaque ; et la glycé- 

 rine par la mannite, le glucose, le lévulose, le mannose et le saccharose. 



