SÉANCE DU 6 MAI 685 



Nouvelle conception de l'anaérobiose. 

 Culture des bactéries anaérobies a l'air libre en présence du fer, 



par Alfred Guillemard. 



Mes recherches antérieures sur la spécificité des ions à l'égard des 

 bactéries (1) m'ont amené à penser que l'oxygène libre possédait une 

 influence toxique sur les microbes anaérobies, parce que ceux-ci, en 

 raison de leur affinité particulière, adsorbaient fortement ce corps et 

 qu'il en résultait une perturbation des échanges osmotiques modifiant 

 l'assimilation et même entraînant la mort de la cellule. 



J'ai donc cherché à ajouter aux milieux de culture une substance qui, 

 en se combinant avec l'oxygène, pût former un ion complexe indifférent 

 pour la membrane cellulaire. Pensant trouver dans le citrate ferreux ce 

 complément antitoxique, j'essayai la solution suivante : Eau 1.000 centi- 

 mètres cubes, Peptone Chapoteaut 20 grammes, Glucose 10 grammes, 

 Citrate d'ammonium 6 grammes. Sulfate ferreux cristallisé 3 grammes. 

 (Dissoudre successivement chaque corps et alcaliniser légèrement avec 

 de l'ammoniaque. On peut aussi remplacer le citrate d'ammonium par 

 le citrate de sodium.) Des tubes simplement bouchés à l'ouate et conte- 

 nant 8-10 centimètres cubes de ce mélange stérilisé, présentèrent un 

 développement abondant en quinze à vingt heures après avoir été ense- 

 mencés avec lou II gouttes de cultures anaérobies des germes suivants : 

 Vibrion septique, Bacille du tétanos, B. du charbon symptomatique, 

 B. sporogène, B. perfrlngens. Les expériences recommencées avec 

 10 fois moins de sulfate ferreux, soit Ô gr. 3 p. 1.000, donnèrent des 

 résultats à peu près identiques et actuellement je poursuis l'étude sur 

 les variations de composition qui peuvent influencer le développement 

 et la survie des bactéries. 



Ces dernières proportions de sel ferreux qui sont équivalentes à une 

 dilution égale à 6/100.000 de fer suffisent donc à modifier totalement la 

 biologie des anaérobies. 



Mais il est nécessaire que la solution nutritive soit employée peu de 

 temps après sa préparation pour éviter un excès d'oxygène par rapport 

 à l'élément antitoxique; on peut, du reste, lui restituer ses qualités 

 perdues au contact de l'air, par une ébullition de quelques minutes. 11 

 faut aussi que le fer soit uni à une substance organique comme l'acide 

 citrique : les essais pratiqués en ajoutant seulement du sulfate double 

 de fer et d'ammonium, comme cela avait été indiqué dans une étude 

 antérieure (2), n'ont pas donné de résultats satisfaisants à cause de la 

 précipitation de l'oxyde de fer en milieux neutre ou alcalin. 



(1) Comptes rendus de la Soc. de Biologie, 16 juillet 1910. 



(2) Liefmann, cité par Jungano et Distaso : Les aérobies. 



