ll'i SOCIÉTÉ DE BIOLOGIE 



Culture de Leishmania tropica sur milieu solide, 

 par Charles Nicolle et L. Manceaux. 



Les premières cultures de Leishmania tropica ont été obtenues par 

 l'un de nous, ainsi que l'avaient été celles du parasite du kala-azar, 

 par ensemencement de l'eau de condensation de tubes de sang gélose 

 de la formule Novy-Mac Neal simplifiée (milieu NNN). Le développement 

 s'y fait avec rapidité et abondance et les repiquages en sont indéfinis. 



On peut également cultiver Leishmania tropica sur la partie solide 

 de ce milieu. Pour cela, deux précautions sont nécessaires : ne pas se 

 servir d'un tube vieux dont la surface serait desséchée, épuiser au préa- 

 lable avec une pipette stérile l'eau de condensation. (Si l'on néglige cette 

 dernière condition, la culture avorte ou ne se fait que dans la partie 

 liquide). 



En ensemençant un tube ainsi préparé à l'aide d'une anse de platine, 

 on voit, à la température de 20-22 degrés, se développer au bout de 

 quatre à cinq jours sur la surface de l'agar un très léger voile; puis de 

 petites colonies rondes, saillantes et transparentes, de dimensions 

 d'une tète d'épingle, s'élèvent au-dessus de ce voile; elles se détachent 

 facilement de l'agar. 



Si l'on dilue dans une goutte d'eau physiologique une trace de cette 

 culture et qu'on l'examine sans coloration au microscope, on observe 

 qu'elle est composée d'un noiïibre infini de flagellés identiques à ceux 

 des cultures ordinaires en eau de condensation. Toutefois, les formes 

 arrondies s'y rencontrent avec plus de fréquence. De celles-ci, certaines 

 un peu spéciales sont parfaitement sphériques, immobiles et dépourvues 

 de cil, rappelant l'état de Leishmania dans sa vie parasitaire; d'autres 

 présentent une extrémité antérieure en forme de cône et qui semble se 

 rétrécir pour former le flagelle. 



La culture sur milieu solide permet d'obtenir sans aucune précaution 

 spéciale des préparations colorées parfaites, bien supérieures à celles 

 que donne l'eau de condensation dont la substance albumineuse garde 

 de façon gênante la teinture si on ne prend soin de l'éliminer par des 

 lavages et des centrifugations. 



Avec notre nouveau procédé, il suffit pour obtenir des préparations 

 colorées irréprochables de diluer un peu d'une colonie dans de l'eau 

 physiologique, d'étendre en couche mince sur lame propre, de laisser 

 sécher, fixer à l'alcool absolu et colorer au Giemsa. 



Cette méthode de culture pourrait au besoin servir à la séparation des 

 Leishmania d'avec des impuretés. 



La propriété qu'ont les Leishmania de pousser à la surface du sang 

 gélose n'est pas le résultat d'une acclimatation et de passages successifs ; 



