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Bacille typhique, devient incapable au bout de quelques jours, 

 après centrifugation, de recevoir une seconde culture. 



Nous avons constaté qu'une gélose, en tube à essai, vaccinée 

 par une première culture d'une dizaine de jours, stérilisée à 

 rmitoclaoe (ii5° pendant i5 minutes) reste vaccinée : toute cul- 

 ture à sa surface reste impossible. 



Au bout de combien de temps, un milieu nutritif devient-il 

 inapte à recevoir une seconde culture de Bacille typhique? Dans 

 un tube à essai contenant i5 ce. de gélose inclinée, c'est au bout 

 de 48 heures que la géîose est vaccinée. Un tube de bouillon or- 

 dinaire de i5 ce. est vacciné au bout de i5 à i6 jours. 



Comment le phénomène de vaccination s'étend-il en surface 

 et en profondeur .i^ Dans une fiole conique, coulons une couche 

 de gélose de o,5 cm. de hauteur; ensemençons à sa surface et 

 au centre une anse de Bacille typhique. Au bout de 22 jours 

 d'étuve, pratiquons tout autour de la culture centrale et à des 

 distances variables de petits ensemencements de Bacille typhique; 

 après trois jours d'étuve, toutes les cultures satellites ont poussé, 

 même tout auprès de la culture centrale. Conclusion : la vacci- 

 nation ne s'étend pas en surface. Dans un tube de 4 cm. de dia- 

 mètre, coulons de la gélose en culot sur une hauteur de -10 cm. 

 et ensemençons avec du Bacille typhique toute la surface de la 

 gélose. Après 22 jours d'étuve, recevons le culot de gélose dans 

 le couvercle d'une boite de Pétri ; enlevons d'un coup de scalpel, 

 la rondelle superficielle où la culture est en couche épaisse, puis 

 débitons le culot de gélose en rondelles de 1/2 cm., que nous 

 coulons respectivement dans des tubes à essai. Sur ces tubes in- 

 clinés, refroidis et ensemencés, nous observons la pousse du Ba- 

 cille typhique. La vaccination s'étend dans ces conditions jus- 

 qu'à 3 à 4 cm. environ au-dessous de la première culture. Le Ba- 

 cille typhique pousse d'autant mieux que la gélose est située plus 

 loin de la surface. Conclusion : la vaccination s'étend en profon- 

 deur jusqu'à 3 à 4 cm. environ. 



A quoi est dû cet état nouveau du milieu : à l'épuisement des 

 substances nutritives ou à la présence d'une substance empê- 

 chante.!^ ou encore les deux hypothèses contiennent-elles une part 

 de vérité.^ 



On centrifuge une culture de 20 jours en bouillon ordinaire ; 

 le liquide surnageant est vacciné. On le répartit à doses décrois- 

 santes de 9 ce à I ce dans une série de g tubes, en complétant 

 dans chaque tube jusqu'à 10 ce avec du bouillon ordinaire neuf. 



A chaque tube « bouillon vacciné -h bouillon neuf », corres- 

 pond un tube témoin « eau physiologique -h bouillon neuf, qui 

 permet de voir dans quelle mesure intervient la dilution du mi- 

 lieu neuf. Après 18 heures d'étude à 37°, comptons les Bacilles 



