(33) SÉANCE DU 26 FÉVRIER . 473 



courante quelques minutes et ensuite on colore. Le. même pro- 

 cédé peut servir si l'on désire appliquer la triple coloration à des 

 tissus fixés autrement qu'au liquide osmique. 



2° Au début, nous avons toujours préconisé les solutions de 

 safranine à i p. loo ; c'est à ce titre que tous les échantillons de 

 safranine dont rend compte le mémoire de 1908, furent examinés 

 et aboutirent à des résultats très médiocres. Comme notre vieille 

 safranine donnait au contraire des images impeccables en solution 

 à I p. 100, nous pensions qu'il était nécessaire de recourir à une 

 concentration en somme assez forte quand il s'agit de substances 

 colorantes aussi puissantes. J'ai observé, depuis lors, qu'il est 

 au contraire indispensable de réduire très notablement le titrage. 

 N'importe quelle safranine, de n'importe quelle provenance, peut 

 donner d'excellents résultats à condition d'être employée à 1/2, 

 à ijk et môme à 1/8 pour 100. Il faut donc instituer quelques 

 essais préparatoires et déterminer la concentration optima pour 

 chaque espèce de safranine. En outre, les safranines à reflet bru- 

 nâtre sont meilleures que celles à reflet violacé. Les colorations 

 prolongées pendant 2k heures, mais en solution faible, sont tou- 

 jours préférables aux procédés rapides. 



3° Le violet de gentiane à i p. 100 ne présente pas les incon- 

 vénients de la safranine. La différenciation atteint le violet beau- 

 coup plus que celle-ci et la surcoloration est moins à craindre 

 précisément parce que le violet, venant après une première colo- 

 ration, agit par substitution et dans les limites de cette première 

 imprégnation. 



4° L'orange G dont la concentration nous semblait pouvoir 

 être mesurée par simple inspection, doit être, en effet, plus con- 

 centrée pour les tissus embryonnaires que pour les tissus adultes. 

 Mais il est néanmoins indispensable de fixer le titre avec quel- 

 que précision. En effet, l'orange exerce une action très particu- 

 lière lorsqu'il est trop concentré : quoique sa réaction soit acide, 

 et que l'on pourrait supposer qu'il intervienne dans la décolora- 

 tion du violet, il agit au contraire comme mordant ; il bloque 

 pour ainsi dire les deux autres colorants. Aussi, malgré l'emploi 

 d'alcool absolu fortement acidulé (HCl), le violet tient solidement 

 aux tissus et la différenciation la plus prolongée, dans l'alcool 

 aussi bien que dans l'essence de girofle, ne conduit plus qu'à des 

 préparations sales, presque opaques, la plupart du temps inutili- 

 sables. 



J'estime aujourd'hui que les échecs signalés par les auteurs, 

 tiennent encore plus à l'orange employé en solution trop concen- 

 trée qu'à la qualité de la safranine. 



Selon le genre de tissus et les éléments spéciaux que l'on veut 

 mettre en évidence, les cellules interstitielles par exemple, il faut 



