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SÉANCE DU oO AVRIL 837 



assez semblable sur les différentes préparations à comparer, afin 

 que les manipulations ultérieures se fassent dans des conditions 

 identiques. Après séchage des plaques dans l'étuve à 87 ^ je pro- 

 cède à la fixation. 



c) Fixation. — i" Température indéterminée (méthode de 

 Ziehl ordinaire), la lame est passée dans la flamme 20 (techni- 

 que V) ou 10 fois (technique VI). 2° Température connue. Il était 

 nécessaire de déterminer plus exactement la température que par 

 les procédés indiqués ci-dessus. Technique I : i5 minutes à 

 170-180"; technique II: 1 5 minutes à i4o-i5o°; technique III: 

 i5 minutes à io5°; technique IV : i5 minutes à 60°. Les résultats 

 obtenus sont sensiblement les mêmes pour chacune des techni- 

 ques, si le temps de fixation est porté à 3o minutes, ce qui paraît 

 indiquer que, dans les limites ci-dessus, la hauteur de la tempé- 

 rature est plus importante que sa durée d'action. 



d) Coloration. — J'ai employé indifféremment la fuchsine de 

 Ziehl à chaud pendant 2 minutes, à 87° pendant i5 minutes, à 

 i5-20° pendant une heure. Après l'action du bain de fuchsine, 

 les préparations sont lavées dans un baiii d'eau, puis sont agitées 

 pendant 20 secondes dans les bains successifs : acide sulfurique 

 au 1/4, eau, alcool à 60°, eau. Enfin, elles sont recolorées par le 

 bleu de méthylène de Kûhne et lavées à l'eau (dans des cristalloirs, 

 de manière à éviter le « jet » d'eau qui décolle parfois certaines 

 parties de l'étalement). 



Résultats. — J'ai examiné, par les diverses techniques que je 

 viens de décrire, un total de 16 cultures d'un Bacille (( homo- 

 gène » de ITnstitut Pasteur de Paris, depuis le jour même de 

 rensemencement, jusqu'au 100^ jour, en répétant les examens 

 quotidiennement ou à des intervalles plus. longs. 



Voici les résultats que j'ai obtenus pour l'ensemble des cultures 

 glycérinées ou sans glycérine, en tenant compte des précautions 

 indiquées plus haut à propos de l'étalement et de l'élimination 

 des substances altérantes du milieu de culture. Je désignerai sou& 

 le nom de Bacilles rouges ceux qui sont acidorésistants et sous le 

 nom de Bacilles bleus, ceux qui ne gardent pas la fuchsine. Je 

 n'ai tenu compte, dans mes calculs, que des Bacilles nettement 

 rcconnaissables. 



Technique I : Tous les Bacilles sont bleus (100 p. 100) et pré- 

 sentent habituellement un aspect homogène (les Bacilles prove- 

 nant de cultures glucosées et non centrifugées sont plus ou moins 

 altérés). Par cette technique, la perte de l'acidorésistance est la 

 règle, quel que soit l'âge de la culture. 



Technique II : Les préparations provenant de cultures glucosées 

 non centrifugées donnent 100 p. 100 de Bacilles bleus. Les autres 



