(33) SÉANCE DU 14 MAI 993 



traces d'acide picrique, qui restent parfois dans les coupes, nui- 

 sent à la réaction ou même l'empêchent, selon leur quantité ; 

 c'est pour cette raison que nos premiers essais avec des coupes 

 incluses dans la paraffine et collées sur lame n'ont pas réussi. Dès 

 qu'on lave parfaitement à l'alcool, jusqu'à décoloration complète, 

 on réussit très bien, avec des coupes à la paraffine, collées sur 

 lame. La réaction du tannin-osmium suffit parfaitement pour la 

 coloration des éléments tannophiles : on obtient d'excellentes pré- 

 parations 011 ces éléments se présentent en violet noir sur fond 

 incolore ou jaune, suivant les temps d'action des bains et selon 

 les organes. Les noyaux ne se colorent pas : les protoplasmes sont 

 incolores ou légèrement brun-jaunâtre ; les hématies, jaune d'or, 

 les fibres striées, jaunes. Mais la meilleureniéthode pour la colo- 

 ration des éléments tannophiles est le tannin-osmium-fer, c'est-à- 

 dire la combinaison des deux réactions. En effet, les éléments tan- 

 nophiles fixés et mordancés, après avoir fixé l'osmium, fixent 

 encore le fer ; de cet emploi convergent, il résulte une plus grande 

 intensité de coloration pour un mordançage moins prolongé, une 

 plus grande définition optique, une plus grande électivité, car 

 l'osmium empêche la coloration grise que donne parfois le tan- 

 nin-fer dans les protoplasmes. Après l'action de l'osmium, l'acide 

 chlorhydrique ne déplace plus le fer de sa combinaison avec le 

 complexus tanno-protéique ; il suffit de traiter par l'eau chlorhy- 

 drique une coupe colorée au tannin-osmium-fer pour vérifier que 

 la coupe ne se décolore pas et ne revient pas à la coloration de 

 l'osmium. Nous allons donner maintenant le modus operandi 

 pour la technique du tannin osmium-fer, celle du tannin-osmium 

 simple étant identique. Les pièces fixées par le liquide de Rouin 

 sont lavées longuement à l'alcool à 90°; on coupe à la paraffine 

 et on lave à l'alcool à 90°, jusqu'à décoloration complète des 

 coupes, à cause de l'action nuisible des traces d'acide picrique. 

 Mordançage au tannin à 20 p. too, trois à cinq minutes ; long 

 lavage à l'eau distillée ; accentuation osmique en osmium à 

 2 p. loo, deux à quatre minutes ; lavage à l'eau distillée ; ahm de 

 fer à 3 p. 100, quelques secondes,; lavage à l'eau distillée, déshy- 

 dratation, xylol, baume. Quand on veut différencier, on traite 

 les coupes par le ferricyanure de Weigert plus ou moins dilué. 

 Cette différenciation est un peu délicate. Si l'on veut employer 

 la réaction -simple au tannin- osmium, on suivra la même techni- 

 que, mais alors il faut faire agir l'osmium to à i5 minutes. Après 

 l'osmium, on lave, on déshydrate ; xylol, baume. 



Les principales causes d'insuccès sont les suivantes. La coupe ne 

 se colore pas ou se colore mal : défaut de fixation ; de lavage 

 à l'alcool à 90°; mordançage trop court dans le tannin. La coupe 

 présente une coloration trop chargée, avec une définition optique 



