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Technique. — Les discussions antérieures au sujet des lipases néces- 

 sitent remploi d'une technique particulièrement minutieuse; c'est pour- 

 quoi nous avons associé trois techniques en comparant leurs résultats. 



1° V épreuve à la monohutyrine de M. Hanriot suivie du dosage de l'acidité 

 après vingt-cinq minutes d'étuve à 37 degrés. 



■ 2° L épreuve sur graisse neutre de beurre. — La graisse était obtenue après 

 lavage du beurre au carbonate de soude, ctiaufîage une heure à haute tempé- 

 rature, puis dissolution dans Téther sulfurique. Dans chaque tube d'épreuve 

 on déposait 0,5 de graisse de beurre, puis 5 centimètres cubes d'une solution 

 faible de carbonate de soude (o, 73 p. 1.000); enfln, après agitation du mélange, 

 on ajoutait 1 centimètre cube de la suspension de leucocytes à éprouver. 

 Après vingt-quatre heures ou quarante-huit heures suivant les cas, nous avons 

 dosé l'alcalinité des mélanges avec une solution faible d'acide acétique 

 (0,5 p. 1.000). La présence de nombreux témoins nous permettait de savoir le 

 titre exact d'absorption du carbonate de soude par les acides gras mis en 

 liberté dans les tubes en expériences. 



Dans d'autres tubes, le beurre était émulsionné avec le mélange à éprouver, 

 et après vingt-quatre heures on recherchait l'acidité des milieux après adjonc- 

 tion d'alcool pour dissoudre les acides gras. 



3° Vépreuve sur les milieux solides. — Utilisant la technique de S. Derghel, 

 nous avons déposé aussi des globules blancs dans des boîtes de Pétri rem- 

 plies par une coulée de cire jaune pure ou de beurre de cacao. Le beurre de 

 cacao est un milieu très imparfait, tandis que la cire nous semble réunir bien 

 des avantages (1). Après vingt-quatre heures d'étuve à o6 degrés li lipase 

 leucocytaire peut manifester son action en déprimant la cire en une rigole 

 circulaire nettement dessinée autour de la gouttelette déposée. 



Les milieux au beurre et à la cire ont toujours été placés pendant 

 vingt-qualreouquarante-huitheures dans l'étuve de Koch à 54-56 degrés, 

 qui offre l'avantage par sa haute température d'empêcher les développe- 

 ments microbiens. 



Pour nous mettre à l'abri des causes d'erreurs provenant de la pré- 

 sence de sérum dans les émulsions de globules blancs, nous avons tou- 

 jours lavé à plusieurs reprises les exsudais ou les bouillies d'organes 

 dans du liquide chloruré sodique dont la décantation était facilitée par 

 un passage rapide au centrifugeur. Quand il s'agissait d'organes, la 

 quantité de chacun d'eux était la même (1 gramme dilué après broyage 

 ■en présence de sable de quartz dans 2 centimètres cubes de sérum chlo- 

 ruré sodique). Quand il s'agissait de pus, le lavage était prolongé et le 

 culot ensuite dilué de moitié dans du sérum chloruré sodique. Toutes 

 ïiôs expériences ont été exécutées en présence de nombreux tubes té- 

 moins et les dosages faits toujours avec les mêmes solutions. 



(1 ) La cire est un élher gras d'alcool. On peut cependant Tutiliier malgré 

 celte différence chimique pour la recherche de la lipase. 



