308 RÉUNION BIOLOGIQUE DE BUCAREST 



Nous avons étudié à ce point de vue les spores du bacille antliracis, 

 du bacille subtilis et du bacille mesenlericus, et nous avons observé 

 que la colorabilité des spores variait selon qu'elles étaient vivantes ou 

 mortes ; ces dernières prennent rapidement le bleu, tandis que les 

 spores normales traitées par notre réactif restent incolores. 



Les spores mortes qui sont devenues perméables au bleu se colorent 

 tout aussi bien par les solutions diluées des couleurs basiques ; mais 

 elles ne résistent plus à la décoloration par les acides. 



Pour mettre en évidence la coloration dififérentielle des spores, nous 

 faisons des préparations sur porte-objets, et nous les soumettons à 

 Faction de la chaleur ou à celle des solutions antiseptiques; les prépa- 

 rations sont ensuite colorées pendant une minute et lavées simplement 

 à l'eau. 



Dans ces conditions, la chaleur humide à 100° C. modifie la coloration 

 des spores après une demi-heure pour le bacille anthracis ; le chauffage 

 pendant cinq à vingt minutes est insuffisant pour produire cet effet. 



A l'autoclave et à la température de 111° C. il suffit de cinq à quinze 

 minutes pour changer la colorabilité des spores ^Bacille anthracis et 

 bacille subtilis). 



Dans le stérilisateur à air sec, maintenu à 140° C, le chauffage pen- 

 dant quinze à trente minutes ne produit pas de modification appré- 

 ciable des spores, tandis que les bacilles prennent le rouge; après une 

 heure, les spores du bacille anthracis et subtilis commencent à prendre 

 le bleu, tandis que les spores du bacille mesentericus persistent à rester 

 incolores. Ce n'est qu'après une action de trois heures que les spores 

 des espèces en expérience sont bien colorées en bleu; les bacilles con- 

 tinuent à fixer le rouge; si on prolonge l'action de la chaleur pendant 

 cinq à sept heures, on observe que les bacilles redeviennent cyano- 

 philes, tandis que la rapide colorabilité des spores reste la même. 



Les solutions antiseptiques agissant à la température de la chambre 

 ou à 60° C. et notamment le formol et le sublimé à 1 p. 200, demême que 

 le phénol à 2,5 p. 100, n'exercent aucune action sur la colorabilité des 

 spores. 



Portée à l'ébullition, une solution phéniquée à o p. 100 fait apparaître 

 la coloration différentielle des spores après quinze minutes pour le 

 bacille anthracis ; le sublimé à 1 p. 100 dans ces mêmes conditions reste 

 inactif. 



Les solutions alcalines ont, au contraire, une action très prompte; 

 c'est ainsi que la solution décinormale de NaOH et même une solution 

 à 2 p. 1000 modifient la colorabilité des spores en cinq minutes, à la 

 température de l'ébullition ; avec la solution normale, cette modifi- 

 cation s'obtient presque instantanément. 



A la température de la chambre, les solutions alcalines concentrées 

 ont une action tout aussi prononcée, mais beaucoup plus lente. 



