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Influence du phosphate disodique sur la tyrosinase, 

 par J. WoLFF. 



J'ai déjà montré (1) que les actions oxydasiques sont favorisées dans 

 un grand nombre de cas par la présence de faibles doses de sels alcalins 

 tels que : diphosphates, citrates tribasiques, etc. 



La tyrosinase occupant une place assez spéciale dans le groupe des 

 oxydases, il m'a paru utile de rechercher si cet enzyme est également 

 sensible à l'influence activante d'un milieu faiblement alcalin. 



J'ai pu constater ainsi que de faibles doses de diphosphates alcalins 

 exaltent considérablement l'activité de la tyrosinase. 



A cet effet je me suis servi de la méthode décrite par M. Agulhon dans sa 

 thèse (2) : elle repose sur la précipitation des mélanines soluhles par le 

 chlorure de calcium. Au lieu de filtres tarés en papier comme le conseille 

 M. Agulhon, je me sers de creusets de Gooch. Je crois que l'exactitude des 

 i-ésultats ne peut que gagner à cette substitution. 



Mes expériences comparatives ont été faites dans deux niatras renfermant 

 chacun bOO centimètres cubes d'eau saturée de tyrosine; on ajoute au liquide 

 de l'un des récipients 10 centimètres cubes d'une solution de phosphate 

 disodique renfermant gr. 28 de ce sel cristallisé ; l'autre matras reçoit 

 10 centimètres cubes d'eau pour que le volume du liquide reste le même 

 dans les deux récipients; on ajoute ensuite dans les deux matras 4 centi- 

 mètres cubes d'un extrait aqueux de Russula delica, obtenu en faisant 

 macérer pendant trois heures 2 gr. b de champignons desséchés dans 40 cen- 

 timètres cubes d'eau. Après agitation, on laisse l'oxydation se poursuivre 

 pendant vingt-quatre heures, puis on porte Ja température à 100 degrés 

 pendant un quart d'heure pour détruire la diastase. Après refroidissement, 

 on ajoute 10 centimètres cubes de solution phosphatée dans le matras qui 

 n'avait pas été additionné de sel et 10 centimètres cubes d'eau dans l'autre, 

 puis on verse dans chacun des deux matras 5 centimètres cubes d'une solu- 

 tion de chlorure de calcium à 10 p. 100. On agite et l'on voit les mélanines se 

 précipiter au bout de quelques minutes. Le produit obtenu sans phosphate a un 

 aspect boueux. Vautre produit est d'un beau noir d'ébène. On laisse déposer 

 quelques heures et l'on décante le plus possible du liquide surnageant, que 

 l'on conserve jusqu'au lendemain; on décante alors de nouveau le liquide 

 clair que l'on rejette (ce tour de main facilite singulièrement les manipula- 

 tions ultérieures); puis on filtre les résidus sur des creusets de Gooch reliés à 

 une trompe à eau et l'on opère sous une faible pression Les creusets qui sont 

 garnis d'une mince couche d'amiante ont été séchés à 110 degrés. Quand tout 

 le résidu a été recueilli, on lave sommairement et on sèche de nouveau à 



(1) J. Wollf, Nouvelles analogies entre les oxydases naturelles et artifi- 

 cielles. Comptes rendus de V Académie des sciences, t. CXLVIIl, p. 946. 



(2) Henri Agulhon. Thèse de doctorat es sciences, février 1910. 



