SÉANCE DU IC AVRIL 659 



chloroformé, la coloration se produisait très rapidement et à froid, tandis que 

 si l'on se servait des deux autres dissolvants, on ne l'obtenait nette qu'en 

 chauffant le mélange à l'ébullition. 



Examiné au spectroscope, celui-ci donne nettement la bande do l'hydrobili- 

 rubine; mais on n'obtient pas la réaction de fluorescence, car elle est empêchée 

 par l'acide. Toutefois on pourra la provoquer en neutralisant le mélange avec 

 beaucoup de précaution au moyen de quelques gouttes d'une solution saturée 

 de carbonate de soude. Au moment où l'on obtient la neutralité, la fluores- 

 cence apparaît pour disparaître au bout de quelques instants, l'hydrobiliru- 

 bine étant entraînée dans la partie aqueuse et saline surnageante. 



On pourra enfin obtenir une (luorescence plus stable en additionnant le 

 mélange de 10 ou 13 fois son volume d'eau distillée qu'on agite dans une 

 ampoule à décantation ; le chloroforme coloré en rose se sépare; on le filtre 

 sur un petit tampon de coton hydrophile imbibé de chloroforme et on ajoute 

 la solution alcoolique d'acétate de zinc à 1 p. 1000. Il faut prendre garde, 

 dans cette opération, de ne pas entraîner d'eau pendant la décantation, car 

 la plus petite quantité empêche la fluorescence ; on prendra donc la précau- 

 tion indiquée plus haut, c'est-à-dire la filtration sur le coton imprégné de 

 chloroforme. 



2° Action d\in alcali. — L'extrait chloroformique initial est addi- 

 tionné de quelques gouttes d'une solution alcaline au 1/5 (ammoniaque, 

 potasse, soude), puis agité longuement avec 5 ou 6 fois son volume 

 d'eau ; la solution aqueuse est ensuite séparée et filtrée. On l'acidifie 

 avec quelques gouttes d'acide chlorhydrique, aussitôt on remarque que 

 cette solution se teinte en rouge plus ou moins foncé. En l'agitant de 

 nouveau avec du chloroforme, celui-ci entraîne l'hydrobilirubine, carac- 

 térisée par sa bande d'absorption et sa fluorescence qu'on obtient faci- 

 lement en lavant la solution chloroformique à l'eau distillée pour enlever 

 les traces d'acide. 



3" Oxydation lente. — Nous avons remarqué en outre qu'une solution 

 chloroformique initiale, contenant du chromogène caractérisé par les 

 deux réactions précédentes, additionnée de la solution alcoolique d'acé- 

 tate de zinc, ne présente pas de fluorescence immédiate. Cependant cette 

 solution, abandonnée à elle-même après cet essai, présente au bout de 

 quelques heures une légère fluorescence, qui va s'accentuant de jour en 

 jour. 



D'autre part, la même solution chloroformique incolore, évaporée au bain- 

 marie dans une capsule de porcelaine, laisse un résidu rouge brique. Ce résidu 

 repris par un peu d'eau distillée tiède, présente la bande d'absorption de l'hy- 

 drobilirubine, caractérisée encore par la réaction de fluorescence après sépa- 

 ration au moyen du chloroforme. 



L'oxydation lente nous explique le phénomène remarqué par M. le D'' Tri- 

 boulet : des matières fécales peuvent donner une réaction très vive avec la 

 solution de sublimé acétique, indiquant ainsi une très grande quantité d'hy- 

 ■drobilirubine, tandis que les mêmes matières traitées par l'éther acétique et 

 l'acétate de zinc donnent une faible fluorescence. Ceci s'explique par l'oxyda- 



