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la solution est rouge, apparaissent deux bandes d'absorption fugaces situées à 

 chaque extrémité du vert : et avec la coloration bleue il se forme dans 

 l'orangé une large bande qui se réduit progressivement en une raie étroite 

 en d. Enfin, quand le liquide a pris sa teinte verte, une raie intense se mani- 

 feste dans le rouge, entre B et G; elle se trouve bientôt seule et persiste. très 

 longtemps. 



L'oxycholestérine présente la réaction du cholestol exactement avec la 

 même succession de teintes et les mêmes caractères spectroscopiques. La 

 coprostérine, l'hippocoprostérine, l'isocholestérine, qu'on rencontre chez les 

 animaux à côté de la cholestérine, donnent, au contraire, la réaction de 

 Liebermann, d'une façon plus ou moins modifiée. L'isocholestérine, en par- 

 ticulier, donne une coloration jaune qui devient rouge-brune, puis rouge-sang 

 et enfin violette au bout de vingt-quatre heures. Au spectroscope apparaît 

 entre autres une large bande d'absorption enti-e les raies D et E. Du fait de 

 ces caractères différents, la réaction du cholestol ne peut donc servir au 

 dosage colorimétrique qu'autant que la cholestérine est pure et non mêlée 

 à d'autres corps du même groupe. 



Reste à fixer exactement les proportions réciproques et la nature des 

 réactifs pour que les résultats soient toujours comparables. Burchard (1) 

 substitue à l'anhydride acétique l'emploi du chloroforme comme sol- 

 vant, et c'est à la solution chloroformique obtenue qu'il ajoute l'anhy- 

 dride acétique, puis l'acide sulfurique. En tenant compte de ces indica- 

 tions, je procède de la façon suivante : la cholestérine pure obtenue par 

 une technique qui sera mentionnée dans une note prochaine, est dis- 

 soute en chauffant légèrement dans o centimètres cubes d'un mélange à 

 parties égales de chloroforme et d'anhydride acétique et, à la solution 

 refroidie, on mêle deux gouttes d'acide sulfurique concentré. Dans ces 

 conditions la réaction est complète au bout d'une demi-heure et pré- 

 sente alors sa teinte maxirna, qui demeure stable environ une heure. 



L'emploi du mélange anhydride acétique et chloroforme offre l'avantage de 

 dissoudre plus facilement la cholestérine que l'anhydride acétique seul et 

 d'émettre moins de vapeurs incommodantes. Notons que les proportions que 

 j'indique n'ont rien d'absolu. Pourvu que le mélange renferme plus de 

 20 p. 100 d'anhydride acétique, la teinte que l'on obtient quand la réaction 

 est complète est de tous points comparable et d'intensité égale à celle qu'au- 

 rait donné, dans les mêmes conditions, l'emploi de l'anhydride acétique pur. 

 La seule différence observée est la plus ou moins grande rapidité de la 

 réaction selon la nature du solvant. Les proportions d'acide sulfurique doivent, 

 au contraire, être exactement mesurées, car des quantités très voisines de ce 

 réactif donnent, toutes choses égales d'ailleurs, des teintes un peu différentes. 

 Enfin les produits employés doivent èlre anhydres et aussi purs que possible : 

 le chloroforme sec et exempt d'alcool, l'acide sulfurique à 66 degrés Baume, 

 enfin l'anhydride acétique ne doit pas se colorer avec SD'H", comme ce'a 

 arrive fréquemment dans le commerce. 



(I) Burchard. Biss. Rostock (1889). 



