300 RÉUNION BIOLOGIQUE DE BORDEAUX 
plus que la bande dans le rouge. Elle est encore sensible dans des 
liquides dilués au delà du millionième et observés sous une épaisseur 
de quelques centimètres. 
Ajoutons à ce liquide vert quelques gouttes d'acide chlorhydrique 
concentré, la couleur passe au violet pur; la fluorescence disparait et 
on observe les deux bandes de la cholécyanine de Jaffé, séparées par 
une étroite plage jaune au niveau de la raie D. 
On doit admettre qu'il se forme une combinaison des pigments avec 
le zinc et que la réaction n’est pas due à une simple oxydation; l'inter- 
vention du sel de zinc est en effet indispensable. Si elle s’est produite 
spontanément quelquefois, c’est que le matériel ou les réactifs étaient 
souillés par ce sel, ce qui arrive très souvent pour l'alcool conservé dans 
des récipients en tôle galvanisée, comme l'ont montré Roman et Delluc. 
Pour bien réussir, il faut faire réagir les corps dans l’ordre indiqué; 
l'iode étant ajouté avant le sel de zinc par exemple, on ne peut éviter 
une forte bande de cholétéline et la fluorescence est moins belle. 
Cette réaction, au moins en ce qui concerne le spectre, est d’une sen- 
sibilité presque illimitée, ainsi qu'en témoignent les exemples suivants : 
1° Dissoudre 1 milligramme de bilirubine dans 100 centimètres cubes 
d’eau distillée et une goutte d’ammoniaque; prendre dans un tube à 
granules 1 centimètre cube (1/100 de milligramme) de cette solution 
au 1 /100.000 ; ajouter 3 à 4 centimètres cubes d’alcool, quelques gouttes 
d’acétate de zinc, une trace d'’iode et une goutte d'ammoniaque : on 
obtiendra une bande très nette dans le rouge et une coloration verte 
très faible, visibles seulement dans l’axe du tube et, si l’on a été heureux, 
on pourra observer la fluorescence rouge. 
2 Placer 1 centimètre cube de cette solution dans 100 centimètres 
cubes d'urine fraîche préalablement essayée ; faire l'extraction au chlo- 
roforme thymolé, comme il a été dit pour la recherche de l’urobiline, 
continuer comme nous venons de l'indiquer. On apercevra une bande 
faible, mais nelte,ce qui nous porte la sensibilité au dix-millionième. 
3° En faisant l'extraction de la même facon dans des sérums, des 
liquides d’ascite, des liquides pleurétiques, etc., qui sont légèrement 
alcalins, on a pu mettre les pigments biliaires en évidence, en employant 
seulement quelques centimètres cubes de liquide. Il est facile d'obtenir 
le spectre, la couleur et même la fluorescence avec un demi-centimètre 
cube de sérum de cheval. 
Pour les sérums, on ne peut rendre le milieu acide, car on précipite- 
rait l'albumine, et celle-ci retient énergiquement les matières colorantes. 
Dans ce milieu légèrement alcalin, l'extraction se fait néanmoins très 
bien : rien ne saurait mieux réhabiliter le chloroforme de sa déchéance 
comme agent extracteur des pigments biliaires. 
% Enfin, c'est la fréquence de la bande rouge dans un grand nombre 
de recherches de l'urobiline dans les urines de personnes en bonne santé 
