Über den Mechanismus von Hämolyse und. Agglutination durch Ionen. 39 



die der Hitzeflockung stets vorausgehende Denaturierung verantwortlich zu 

 machen ist, wurde folgender Versuch angestellt. Stromatafreie Lysate wurden 

 teils mit primärem, teils mit sekundärem, teils mit einer Mischung gleicher Teile 

 primären und sekundären Phosphats versetzt, in ein Wasserbad von 58° gebracht 

 und nach 10 Minuten, ehe noch in einem der Röhrchen eine Trübung sichtbar war, 

 zu den Mischungen mit primären Phosphat so viel NaOH, zu den mit sekundären 

 so viel HCl zugegeben, als zur Umwandlung in die „Neutralmischung" (prim. : 

 sek. = 1:1) notwendig ist; zu den „neutralen" Mischungen wurden teils gleiche 

 Mengen HCl, teils NaOH., gegeben. In den neutralisierten Mischungen trat sofort 

 starke Trübung ein, die jetzt erst sauer, bezw. alkalisch gemachten blieben klar. 

 Genau dasselbe trat ein, wenn die Proben vor dem zweiten Zusatz auf 20 ° abgekühlt 

 worden waren und die Zusätze nun bei Zimmertemperatur erfolgten. H' und OH' 

 beschleunigen also die in der Wärme eintretende Dehydratation des Hämoglobins stark; 

 hierauf beruht wohl in erster Linie die Verstärkung der Wärmeflockung durch 

 mittlere Ionenkonzentrationen. 



Beeinflussung der Flockung durch Kochsalz. 



Auch der Gesamtsalzgehalt der Lysate erwies sich bei der Wärmeflockung nach 

 verschiedener Richtung hin von Bedeutung. Vergleicht man die Wärmeflockung 

 von Lysaten bei 0,9% und bei 0,02 — 0,1% Kochsalz, so fällt in erster Linie eine 

 starke Beschleunigung der Flockung bei dem höheren Kochsalzgehalt auf; gleich- 

 zeitig ist der Flockungsbereich verbreitert, d. h. die Flockungshemmung macht 

 sich erst bei höheren Konzentrationen von H', OH', Metall- oder Farbstoff ionen 

 geltend. Es war nun wiederum die Frage, ob diese Verstärkung der Hitzeflockung 

 bei höherem Salzgehalt auf einer Förderung der Flockung als solcher oder der der 

 Flockung vorausgehenden Dehydratation beruhe. Dies wurde folgendermaßen 

 untersucht. Eine Reihe von je 10 ccm 1 proz. Lysate mit 0,02 proz. NaCl wurden ins 

 Wasserbad von 58° gebracht und die einzelnen Röhrchen nach 0, 1, 2, 3 usw. 

 Minuten je mit 1 ccm vorgewärmter 9proz. NaCl-Lösung versetzt. Es dauerte nun, 

 ob das Kochsalz sofort oder erst nach 10 Minuten Hitzeeinwirkung zugegeben 

 wurde, jedesmal vom Kochsalzzusatz ab genau 15 Minuten, bis Trübung eintrat. 

 Erst wenn die dem Kochsalzzusatz vorausgegangene Hitzeeinwirkung länger wie 

 10 Minuten gedauert hatte, zeigte sie einen merklichen verkürzenden Einfluß auf 

 die Flockungszeit ; nach 15 Minuten Hitzeeinwirkung z. B. betrug die Zeit bis zur 

 Trübung unter Kochsalz noch 12 Minuten. Ganz ohne Kochsalz gelassen waren 

 dagegen die Mischungen auch nach l 1 / 2 Stunden nur erst opak und zeigten auch 

 keine Spur einer Verstärkung der Trübung, wenn der Kochsalzzusatz erst nach 

 Abkühlung der Mischungen auf 20° gemacht wurde. Die erhebliche Flockungs- 

 ver Stärkung durch Kochsalz muß also auf einer Förderung des der eigentlichen Flockung 

 vorausgehenden Dehydratationsprozesses beruhen. 



Anders verhielten sich Lysate, die mit mittleren dem Übergangsbereich der 

 Flockungs- zur Hemmungszone entsprechenden Konzentrationen von H', OH', 

 Metall- und Farbstoffionen versetzt waren. Auf diese wirkte Kochsalzzusatz auch 

 nach Abkühlung flockungsfördernd bezw. trat in Mischungen, die ohne Kochsalz 

 auch beim Kochen klar blieben, nach Kochsalzzusatz in der Kälte Flockung ein. 

 Hier haben wir also die verbreiternde Wirkung des Kochsalzes auf den Flockungs- 

 bereich vor uns. Es handelt sich hierbei wohl um die bekannte entladende Wirkung 

 von Neutralsalzen auf geladenes Kolloid. Wie wir im Abschnitt II 2 gesehen haben, 

 fördert Kochsalz auch die Hämoglobinfällung durch hohe Metallsalzkonzentra- 

 tionen bei Zimmertemperatur und verschiebt ihre Flockungsgrenze nach niederen 

 Konzentrationen. Die beiden bei der Hitzefällung von Lysaten unter Metallsalz- 

 einwirkung vorhandenen Flockungsbereiche rücken somit mit zunehmendem 

 Kochsalzgehalt einander immer näher, und es kommt schon bei 0,9% NaCl durch 



