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diese beiderseitige Einschränkung der Hemmungszone zu einer fast vollkommenen 

 Verwischung der Flockungshemmung, weshalb es zu ihrer Feststellung bei Metall- 

 salzen notwendig ist, in möglichst elektrolytarmen Medien zu arbeiten, außerdem 

 mit möglichst dünnen Hämoglobinlösungen (vgl. hierzu auch Pauli und Flecker). 1 ) 

 Setzt man den Salzgehalt der Lysate noch weiter herab, durch mehrfaches 

 Waschen der Körperchen mit Rohrzuckerlösung vor ihrer Lysierung oder durch 

 achttägiges Dialysieren des stromatafreien Lysats, so ist die Hitzeflockung des 

 Hämoglobins noch weiter abgeschwächt und verzögert. 



2. Einfluß der Ionen auf die Alkoholflockung der Lysate. 



Da bei den War meflockungs versuchen letzten Endes immer nur das 

 Flockungsverhalten des Denaturierungsproduktes des Hämoglobins 

 festgestellt wird, so wurde versucht, durch AlkoJiolüockungs versuche 

 über die Wirkmag der Ionen auf den genuinen Blutfarbstoff Aufschluß 

 zu erhalten. Übrigens deutet die oben erwähnte Beschleunigung 

 der Hämatinbildung in der Hemmungszone schon auf eine Veränderung 

 des genuinen Blutfarbstoffs hin. Nach Pauli 2 ) kann die Aufhebung der 

 Alkohol 'fällbarkeit auch bei hydrophilen Kolloiden als Zeichen ihrer 

 Aufladung gelten. Zwar kommt es bei Alkoholeinwirkung schließlich 

 auch zu einer Denaturierung. In diesbezüglichen Versuchen wurden in 

 der Regel die Lysate mit gleichen Mengen 96proz. Alkohols versetzt 

 und bei Zimmertemperatur beobachtet. Auch bei der Alkoholfällung 

 finden sich nun wie die Versuche mit NaOH (Tab. I), HCl (Tab. IV, 

 ferner Tab. VIII) und HgCl 2 (Tab. V) zeigen, dieselben Flockungshem- 

 mungszonen wie bei der Hitzefällung. Auch der Umfang des Flockungs- 

 bereichs ist in der gleichen Weise vom Kochsalzgehalt abhängig wie bei 

 der Hitzefällung. Die Mischungen des Flockungsbereichs lassen nun selbst 

 einige Zeit nach eingetretener Fällung weder bei Spektroskopie der ge- 

 trübten Mischungen, noch nach vollständiger Wiederauflösung durch 

 hochkonzentrierte Kochsalzlösung (s. Abschn. II, 2) Hämatin als 

 Zeichen einer bereits stattgefundenen Denaturierung erkennen, sondern 

 zeigen Farbe und Spektrum des unveränderten Oxyhämoglobins. Die 

 Fällung durch Alkohol vollzieht sich hier also bereits am genuinen 

 Blutfarbstoff, kann somit in der Tat zur Trennung von geladenem und 

 ungeladenem Zustand des unveränderten Kolloids dienen. Wie bei der 

 Wärmeflockung stimmen auch gegenüber Alkohol stromatahaltige und 

 stromatafreie Lysate in den geschilderten Beziehungen vollkommen 

 überein, auch Lösungen krystallisierten Pferdehämoglobins zeigen unter 

 analogen Bedingungen dieselben Flockungshemmungen. 



Die Versuche führen somit zu dem Schluß, daß für die Hämolyse 

 durch H',OH', Metallkationen und Farbstoff anionen ihre Einwirkung auf 

 das Hämoglobin maßgebend ist, und daß diese nicht in einer Fällungswir- 



x ) Biochem. Zeitschr. 41, 501. 



2 ) Kolloidchemie der Eiweißkörper 1. Hälfte, S. 32. 1920. 



