448 W. Hertz: Die Vitalfärbung von Opalina ranarum mit Säurefarbstoffen 



Vitalfärbung der Opalinen mit Cyanol usw. eintritt, befinden sich also 

 auch kochbeständige 1 ). 



Bei den Kontrolltieren in reiner Ringerlösung machte sich wieder 

 z.T. eine schlechte Haltbarkeit in den 24 Std. der Versuchsdauer 

 geltend, wie oben schon erwähnt wurde. Sehr oft war die Eigenbewegung 

 stark herabgesetzt, z. T. nur starker Flimmerschlag vorhanden. Auch 

 in farbloser Lösung und bei Verwendung von doppelt destilliertem 

 Wasser kamen diese Fälle vor. Dabei waren die Tiere in den farbigen 

 Kontrollösungen stets ganz hell und ungefärbt. 



Diese Tatsachen führten zu einer näheren Untersuchung über die Wirkung 

 der Ringerlösung auf die Opalinen. Die Zusammensetzung meiner Ringerlösung 

 war 0,65% NaCl, 0,014% KCl, 0,012% CaCl 2 und 0,01% NaHC0 3 . Das Bicarbonat 

 kann ohne Veränderung der Versuchsergebnisse fortgelassen werden. „Wäscht" 

 man nun Opalinen in Ringerlösung, indem man sie aus dem ersten Schälchen 

 in ein wieteres gleiches überträgt, so daß Verunreinigungen immer mehr aus- 

 geschlossen werden, so zeigt sich meist schon bei der zweiten und dritten Über- 

 tragung, daß einige Tiere die Bewegung einstellen und stark flimmernd am Boden 

 des Schälchens „kleben", so daß man sie kaum mit der Capillare fortnehmen kann. 

 Läßt man eine solche 4. Übertragung in reine Ringerlösung 12 Std. stehen, so 

 sind nach dieser Zeit die Opalinen z. T. tot und cytolysiert, z. T. ohne jeden Flimmer- 

 schlag, dabei hell und feinblasig im Innern, z. T. zeigen sie langsame Eigenbewegung, 

 sind aber sehr dunkel und groß-granuliert. Bringt man solche Tiere in Neutralrot- 

 lösung (0,001%), so färben sich besonders diese bräunlichen „Granula", während 

 die schmalen Zwischenräume nur schwach gefärbt erscheinen. Kontrolltiere in 

 einer Lösung mit Organauszug, die auch zu gleicher Zeit in Neutralrotlösung 

 gebracht werden, zeigen stärkere Diffusfärbung mit nicht so vielen und so stark 

 hervortretenden Granulis. Die diffuse Plasmafärbung zeigt etwas schwächer 

 roten Farbton als die Granula. In anderen Fällen vertragen die Opalinen das 

 „Waschen" sehr viel besser, sind nach 12 Std. noch hell und normal beweglich, 

 zeigen aber nach längerem Verweilen in Neutralrot auch jene merkwürdige stärkere 

 Granulafärbung 2 ). 



Setzt man aber einer Ringerlösung eine Spur Verunreinigung 

 aus dem Darminhalt zu, so steigt die Haltbarkeit der Opalinen 

 sehr stark, ohne daß in einer solchen Lösung mit 1 / 2 °/o Cyanol oder 

 Benzoblau schon Färbung auftritt. Daher wurden fernerhin die 

 Kontrollösungen in dieser Weise angesetzt und erheblich bessere 

 Resultate erzielt. Sobald man aber stärkere Verunreinigungen aus 

 dem Darmzusetzt, so treten schwache Färbungen mit den Säurefarb- 

 stoffen auf. 



Der Vollständigkeit halber sei erwähnt, daß entsprechende Fär- 

 bungsversuche negativ verliefen bei Zusatz von Traubenzucker, Gly- 



x ) Die Trypsinwirkung ist vielleicht nur auf das Eiweiß zu beziehen, das dem 

 benutzten Präparat anhaftete. 



2 ) Jedenfalls ist die Resistenz der verschiedenen Opalinengenerationen aus 

 den verschiedenen Froschdärmen nicht gleich, wie auch Form und Größe der Tiere 

 stark wechselt. 



