Über den Mechanismus der Zelloxydationen und der Blausäurewirkung. 479 



Die Flasche wurde mit Stopfen verschlossen und evakuiert ; gleichzeitig 

 wurde bei Zimmertemperatur öfters kräftig durchgeschüttelt. Es wurde 

 bald Entfärbung bemerkbar, die nach 3 / 4 Stunden immer rascher zu 

 werden schien und nach \ x j 2 Stunden vollständig war. Dann wurde 

 durch trockenes Filter abgegossen; das Filtrat war nur schwach blau- 

 grün gefärbt, ließ sich jedoch weder bei saurer noch alkalischer Reaktion 

 spontan durch den Luftsauerstoff, noch durch Öproz. frisch bereitetes 

 Wasserstoffsuperoxyd reoxydieren, noch bei schwach saurer Reaktion 

 durch Eisenchlorid. Dagegen färbten sich die auf dem Filter Hegenden 

 Muskelteilchen von der Oberfläche her intensiv blau, gaben aber den 

 Farbstoff auch nach Suspendierung in 2proz. Wasserstoffsuperoxyd 

 nur zum kleinsten Teil wieder an das wässerige Medium ab. 



Ergebnis : Der Reduktionsumf ang von 2 g Froschmuskelzellen in 

 ■8— 24 Stunden (ohne Unterschied ; vgl. die Reduktionszeitkurve S. 484) 

 beträgt 20—25 mg Nitrophenylhydroxylamin in destilliertem Wasser. 

 In isotonischer NaCl-Lösung ist der Reduktionsumf ang um 35% ge- 

 steigert, Gegenwart von 0,01% CaCl 2 drückt ihn dagegen um 40—50% 

 herab, so daß Ringerlösung kein günstiges Reaktionsmiheu darstellt. 

 Die Reduktionsgeschwindigkeit schnellt in Phosphatlösungen stark 

 empor; sowohl in l,5proz. K 2 HP0 4 -Lösung als in Phosphatpufferge- 

 misch von £> H = 7,4 werden in 2— 4 Stunden bereits 20 mg Nitrophenyl- 

 hydroxylamin gebildet, in 8—24 Stunden ca. 40 mg. Die Steigerung in 

 Phosphat gegenüber destilliertem Wasser beträgt also rund 100%. 

 Dabei ist zu berücksichtigen, daß die Nitrophenylhydroxylaminbildung 

 nur bei reichlichem Überschuß an reduzierbarem Dinitrobenzol ein 

 eindeutiges Maß oxydo-reduktiver Zellprozesse ist, da sonst das Hy- 

 droxylamin selbst weiter bis zum schwächer gefärbten Amin reduziert 

 wird; z. T. findet das bereits bei der hohen Reduktionsgeschwindigkeit 

 in sekundärem Phosphat statt, kenntlich an dem Ausfall der Prüfung 

 auf Azofarbstoffbildung mit a-Naphthol. Daß es sich dabei aber in 

 vorhegenden Versuchen noch um keinen sehr ins Gewicht fallenden Fehler 

 handelt, zeigen im folgenden zu schildernde Bestimmungen der jeweils 

 gebildeten Kohlensäuremenge, deren Werte in Phosphat gegenüber 

 destilliertem Wasser entsprechend gesteigert sind. 



Aus Versuch 10 geht übrigens auch hervor, daß das Herausdiffun- 

 dieren des entstandenen Nitrophenylhydroxylamins aus den Muskel- 

 zellen in die Lösung so gut wie vollständig ist, da der Ätherextrakt 

 des gesamten Reaktionsgemisches keinen höheren colorimetrischen 

 Wert zeigte als das Muskeif iltrat selbst. Es ist bemerkenswert, daß 

 bei der Mtroreduktion die Indicatorsubstanz eine hohe Zelllöslichkeit 

 und minimale Wasserlöslichkeit besitzt, das Reduktionsprodukt dagegen 

 äußerst schnell aus den ZeUen in die wässerige Lösung diffundiert. 

 Umgekehrt ist sowohl Methylenblau als seine Leuko Verbindung in hohem 



Pfiügers Archiv, f. d. ges. Physiol. Bd. 196. 32 



