328 Otto Warburg: 



pipettiert , eine Spur Sperma zugegeben , gemischt und sofort auf 

 ca. 2,5 ccra zusammenzentrifugiert. 2 ccm des Sediments wurden 

 dann in ein Atmungsgläsehen gefüllt, das samt Manometer so vor- 

 bereitet war, dass 10 Minuten nach der Befruchtung der Hahn ge- 

 schlossen werden und die Messung beginnen konnte. Die Atmung 

 wurde dann von 5 zu 5 Minuten beobachtet, wobei sich zeigte: 

 erstens, dass sie sich innerhalb der ersten 20 Minuten merklich nicht 

 änderte, und zweitens, dass sie, bezogen auf den später bestimmten 

 N-Gehalt, von vornherein ca. sechsmal so gross war, wie die der 

 unbefruchteten Eier. Der Oxydationsanstieg von 500% ist 

 also 10 Minuten nach der Befruchtung schon da. Näher 

 an den Augenblick der Befruchtung heranzukommen, ist mir bis 

 jetzt aus verschiedenen Gründen nicht gelungen. — Zur Bestimmung 

 des Atmungsanstiegs im Lauf der Entwicklung kamen 

 je 10 ccm der Stammsuspension mit je 100 ccm Seewasser in flache, 

 sich langsam bewegende Schalen. Von Zeit zu Zeit wurde das Wasser 

 gewechselt, wobei Eiverluste nicht zu vermeiden waren; die Ge- 

 nauigkeit der Resultate wurde dadurch nicht beeinträchtigt, weil in 

 jeder Probe nach der Atmungsmessung der Stickstoff bestimmt und 

 alles auf gleiche Stickstoffmengen bezogen wurde. Der Inhalt der 

 Schalen wurde nach den in der Figur markierten Zeiten durch 

 Zentrifugieren auf 2,5 ccm gebracht, 2 ccm des Sediments in ein 

 Atmungsgläschen pipettiert, innerhalb 20 Minuten der Sauerstoff- 

 verbrauch gemessen und schliesslich der Inhalt des Gläschens nach 

 Kjeldähl verascht. Ein derartiger 24 stündiger Versuch ist nicht 

 gerade schwierig, aber recht mühsam. Damit sich keine Bakterien 

 in den Kulturen entwickeln, muss das Seewasser zeitweise erneuert 

 werden. Damit der Versuch brauchbar ist, muss die Kultur besser 

 sein, als es für irgendwelche morphologischen Untersuchungen nötig 

 ist. Praktisch alle Eier müssen befruchtet sein; sie müssen 

 gleichzeitig befruchtet sein, und sie müssen sich alle gleich- 

 zeitig entwickeln. Bleibt ein nennenswerter Bruchteil der Eier 

 in der Entwicklung stehen, entwickeln sich nicht praktisch alle Eier 

 zu schwimmenden Blastulae und Gastrulae, so ist der Versuch un- 

 brauchbar. — In den vier Versuchen, über die oben berichtet wurde, 

 war diesen Bedingungen Genüge getan. 



