Beiträge zur Kenntnis pflanzlicher Oxydationsfermente. 85 



Wiegemesser fein gewiegt und dann mit physiologischer Kochsalz- 

 lösung Übergossen. Die Lösung hatte die Konzentration von 7 pro Mill. 

 Blattmasse mit Lösung wurden über Nacht sich selbst überlassen. 

 Am nächsten Morgen wurden die Schnitzel mittels gewöhnlichem 

 Glastrichter und Filtrierpapier vom Extrakt abfiltriert. Das wahr- 

 scheinlich durch die Anwesenheit oxydierter und oxydierender Sub- 

 stanzen stark braun gefärbte Filtrat wurde bis zur weiteren Verwendung 

 in einer Glasstöpselflasche aufbewahrt. Inzwischen wurde ein weiterer 

 Versuch mit Flieder (Syringa vulgaris) angestellt. Fliederblätter, 

 Blüten und Knospen, ferner die grünen Stengel mit den Kelchen 

 wurden je einzeln klein gewiegt, und jede der drei Massen wurde 

 mit physiologischer Kochsalzlösung (7 pro Mill.) übergössen und 

 unter einer Glasglocke über Nacht ausgelaugt. Die holzigen Stengel 

 wurden ebenfalls gut zerkleinert und in einer Glasflasche, die einen 

 festsitzenden Stopfen hatte, mit Kochsalzlösung bedeckt (bis zum 

 Band), auch unter der Glasglocke ausgelaugt. Um klarere Lösungen, 

 die nicht durch oxydierte Substanzen braun gefärbt sind, zu erhalten, 

 musste die Luft möglichst abgeschlossen werden. Eine Reduktion 

 des Luftzutritts, wie sie durch Vollfüllen der Aufbewahrungsflaschen 

 bis zum Rand und durch Überstülpen einer Glasglocke bewerkstelligt 

 werden kann, erwies sich als unzureichend, um die Bildung der 

 braunen Umsetzungsprodukte bis über die Ausführung der Versuche 

 hinaus zu verzögern. Der Peroxydasenachw^is sollte mit der Benzidin- 

 reaktion ausgeführt werden. Zu diesem Zwecke wurde zunächst 

 vorhandenes Benzidin nochmals aus heissem Wasser umkristallisiert; 

 von dem auf Tonfilter getrockneten Benzidin wurde eine 4^/oige und 

 eine 2 ®/o ige Lösung in 96 "/o igem Alkohol hergestellt. Ferner wurde 

 mit E. Merck 's reinem Wasserstofi'superoxyd eine 3% ige und eine 

 0,25 %ige Lösung desselben bereitet. Die Peroxydasenreaktion wurde 

 zunächst an Milch studiert. Wilkinson und Peters, auch Teichert 

 („Methoden zur Untersuchung von Milch und Molkereiprodukten" aus 

 „Die chemische Analyse", Bd. 8—9. Friedrich Enke's Verlag, 

 Stuttgart) geben folgende Vorschrift: „Zu 10 ccm der zu prüfenden 

 Milch fügt man 2 ccm einer etwa 4 ^/o igen (1 g in 25 ccm) alko- 

 holischen Benzidinlösung hinzu, dann 2 — 3 Tropfen Essigsäure, 

 welche Menge zur Gerinnung der Milch hinreichend ist, und schliesslich 

 2 ccm einer 3% igen Wasserstoffsuperoxydlösung. Bei ungekochter 

 Milch tritt sofort deutliche Blaufärbung ein. Es ist ratsam, die 

 Lösung des Wasserstoffsuperoxyds an der Wandung des schräg ge- 



