Beiträge zur Kenntnis pflanzlicher Oxydationsfermente. 95 



waschen, Trocknen, Filterverasehen und Wägen des Silbers in der 

 Oxydform), eine solche Menge Arbeit bedeuten, dass eine für meine 

 Versuche notwendige rasche Quantitätsbestimraung der „Reduktase" 

 auf diesem Wege, selbst wenn er sonst gangbar gewesen wäre, aus- 

 geschlossen erschien. Ich habe daher, und weil noch andere Be- 

 denken (z. B. die fällende und damit verändernde Wirkung des 

 Silberkations auf das kolloidale Ferment) im Wege standen, auf den 

 weiteren Ausbau dieser Methode verzichtet. Bessere Resultate wurden 

 mit Hilfe kolorimetrischer Bestimmungsverfahren erzielt. Zunächst sei 

 ein Verfahren erwähnt, das ich als „Verdünnungsmethode" 

 bezeichnen möchte. — Der durch das Ferment zu reduzierende 

 Farbstoff war ebenfalls das Methylenblau. Der Gang der Bestimmung 

 war der folgende: Zwei Reagenzgläschen wurden mit gleichen Mengen 

 Farblösung beschickt; in das eine wurde der zu untersuchende 

 Pflanzensaft, in das zweite eine gleiche Menge Wasser gegeben. 

 Durch die Reduktase wird nun das Methylenblau mehr oder 

 weniger reduziert, und die Lösung erscheint heller. Nach einer 

 bestimmten Zeit wird dem Kontrollgläschen so viel Wasser, am ein- 

 fachsten aus einer exakt graduierten Bürette, hinzugefügt, bis es 

 den Farbentoü der Reduktase enthaltenden Probe angenommen hat. 

 Die hierzu erforderliche Menge Wasser dient als Vergleichsmaass 

 für die vorhandene Reduktasequantität, da naturgemäss um so mehr 

 Wasser zur Kontrolle hinzugefügt werden muss, je stärker die Reduktase- 

 wirkung während einer bestimmten, natürlich immer gleichen Versuchs- 

 zeit ist. Diese Bestimmungsart ist eine indirekte, aber im Prinzip 

 wohl brauchbar; praktisch erwies sich jedoch die Reduktase- 

 bestimmung auf diese Weise als schwierig ausführbar, weil die 

 Nuancenempfindlichkeit des menschlichen Auges im Blau am geringsten 

 ist. Durch Ersatz des blauen Farbstoffes durch eine andere leicht 

 in eine Leukobase übergehende Substanz Hesse sich diesem Übel- 

 stand abhelfen. Immerhin lassen sich auch mit Methylenblau durch 

 längeres Üben leidlich richtige, für die relative Vergleichsbestimmung 

 genügende Einstellungen erreichen. — Es sei als Erläuterungs- 

 beispiel hier ein an einem Rosskastanienblätterauszug angestellter 

 Versuch angeführt. Vom Auszug wurden verschiedene Versuchs- 

 verdünnungen hergestellt, und zwar 1 : 100, 1 : 50, 1 : 30 und 1 ; 10. 

 Die Verdünnung 1 : 100 erwies sich für die Reduktion als zu schwach 

 wirksam. Zu der Verdünnung 1 : 50 wurden 2 ccm Methylenblau- 

 lösung (früher erwähnte Lösung 1 : 100) zugegeben ; die Lösung war 



