Zur G-ewinnung des Gerinnungsfermentes aus Blutserum. 321 



plasmas versetzt. Dabei tritt überhaupt kei ne Gerin n u ng ein. Auch nach 

 24 Stunden war die Lösung noch vollkommen flüssig. 



Wahrend also bei unserer Fermentlösung nach Entfernen des 

 Alkohols die wirksame Komponente noch in vollem Maße vorhanden 

 ist und eine ebenso kompakte Gerinnung des Substrates herbeiführt, 

 wie sie der normalen Blutgerinnung entspricht, ergibt der blinde Ver- 

 such zwar mit Alkoholgehalt eine unvollkommene Gerinnung ähnlich 

 wie der reine Alkoholversuch, allerdings in etw r as kürzerer Zeit, aber 

 nach Entfernen des Alkohols ist in dem blinden Versuch überhaupt 

 keine Wirkung mehr vorhanden. 



Danach glaube ich sicher annehmen zu dürfen, daß in unserem 

 Präparat wirklich die gerinnungsfördernde Komponente des Blut- 

 serums, die als „Gerinnungsferment" bezeichnet wird, gefaßt ist. 



Zum Schlüsse dürfte es zweckmäßig sein, noch einmal die von uns 

 in unserer früheren Veröffentlichung gegebene Vorschrift zur Dar- 

 stellung unserer Fermentlösung in der neuen Form zu wiederholen. 

 Dabei bemerke ich, daß ich das Verfahren in einem Punkte vereinfacht 

 habe. In unserer früheren Vorschrift war angegeben, daß nach der 

 Ausfällung mit Eisenlösung der entstandene Niederschlag durch 

 Zentrifugieren abgetrennt und alsdann die von dem Niederschlag ab- 

 gegossene Lösung mit Alkohol versetzt werden sollte. Diesen zeit- 

 raubenden Schritt kann man sich sparen und direkt nach dem Zusatz 

 der kolloidalen Eisenhydroxydlösung mit Magnesiumsulfatzusatz, die 

 Lösung samt dem Niederschlag mit Alkohol versetzen. 



Ich habe auch noch in einigen anderen Punkten das Verfahren 

 etwas modifiziert, wie sich aus folgender Zusammenstellung ergibt: 



I. Herstellung des Serumcaseins. 



Zusatz von Caseinpulver, 1 g auf 100 com Rinderserum. Auflösung des Caseins 

 im Schüttelapparat. 



Ausfällung des Caseins mit Essigsäure in folgender Art: Zuerst zu der Casein- 

 serumlösung das gleiche Volum Wasser gesetzt. Dann Essigsäure zugesetzt bis 

 zum Entstehen einer guten Fällung. Alsdann noch die Hälfte der bis dahin ver- 

 brauchten Essigsäure mehr zugesetzt und danach noch ein Volum Wasser zugegeben, 

 so daß also das Volum des angewandten Serums auf das Dreifache kommt. 



Der Caseinniederschlag auf dem Filter gesammelt, mit etwas destilliertem 

 Wasser ausgewaschen, ausgepreßt und im Vakuum über Schwefelsäure getrocknet. 

 Das trockene „Serumeasein" fein gepulvert. 



IL Herstellung der alkoholhaltigen Fermentlösung aus dem 

 Serumcasein. 



Auf je 10 g des Pulvers 50 ccm Wasser zugesetzt und damit verrieben. Zusatz von 

 Normalnatronlauge bis zu neutraler Reaktion auf Lackmuspapier. Dabei entsteht 

 gewöhnlich ein dicklicher Brei. Alsdann weiterer Zusatz von Normalnatronlauge, und 

 zwar 10 bis 12,5 ccm, so daß die Lösung etwa 1 / 5 bis 1 / 4 normal wird. Dabei verwandelt 

 sich der Brei in eine dickliche Lösung. Einige Minuten stehen lassen. 100 ccm 

 Wasser zusetzen. Dann neutralisieren mit 10 bis 12,5 ccm Normalsalzsäure. Zusatz 

 der letzteren tropfenweise unter beständigem^ Verreiben, so daß das bei den einfallen- 

 den Tropfen sich ausscheidende Casein möglichst immer wieder in Lösung geht. 



