322 M. Bleibtreu: Zur Gewinnung des Gerinnungsfermentes aus Blutserum. 



Dann läßt man die Lösung etwa 1 / i Stunde lang stehen. Zusatz von kolloidaler 

 Eisenhydroxydlösung (Liqu. ferri oxyd. dialys. Kahlbaum), und zwar 15 cem der aufs 

 dreifache verdünnten käuflichen Lösung. Zusatz von 2,5 cem gesättigter Magnesium- 

 sulfatlösung. Diese Zusätze unter beständigem Verrühren, dann nach einigen Minuten 

 Warten Messung des Gesamtvolumens der Lösung und Zusatz von x / 2 Volum Alkohol. 



Abtrennen der entstandenen Fällung durch Filtration. Das Filtrat stellt die 

 alkoholhaltige Fermentlösung dar. 



III. Herstellung der gebrauchsfertigen Lösung. 



In Form der alkoholhaltigen Lösung kann das Präparat unbegrenzt lange 

 aufbewahrt werden. Meistens scheidet sich dabei, besonders beim Stehen in der 

 Kälte, noch etwas weiterer Niederschlag ab. Die Lösung wird in diesem Falle noch 

 einmal filtriert. Vor dem Gebrauch Abdunsten von 1 / 3 (oder etwas mehr, aber nicht 

 viel mehr) der Lösung nach oben beschriebenem Verfahren. 



Bei dem Abdunsten ist dafür zu sorgen, daß die Temperatur der Lösung 40° 

 nicht übersteigt. Höhere Temperatur würde zwar das Absdetilheren des Alkohols 

 in erwünschter Weise beschleunigen, schädigt aber die Wirksamkeit. 



Ich habe in einigen Versuchen die Temperaturempfindlickheit der nach dem 

 beschriebenen Verfahren gewonnenen Fermentlösung untersucht und dabei folgen- 

 des gefunden: 



1. Siedetemperatur hebt die Wirksamkeit selbstverständlich ganz auf. 



2. 2 1 / 2 Stunden bei 60—63° gehalten: 



Die Lösung zeigt nur noch eine Spur von Wirkung, insofern, als mit Üxalat- 

 plasma nach einigen Tagen eine — sehr unvollkommene — Gerinnung eintritt. 



3. 2 Stunden bei 49° gehalten: 



Erst nach 17 Minuten eben sichtbarer Anfang einer ganz unvollkommenen Ge- 

 rinnung, die auch erst nach Tagen deutlicher wird. 



Das ist in guter Übereinstimmung mit den Angaben der Autoren über die 

 Temperaturempfindlichkeit des Fibrinfermentes im natürlichen Blutserum. 55° 

 wird gewöhnlich als die Temperatur angesehen, die bei 1 stündiger Dauer das Serum 

 für die Gerinnung unwirksam macht. 



Das oben beschriebene Verfahren hat sich mir bisher als das zweck- 

 mäßigste erwiesen. Ich habe eine ganze Anzahl von Rindersera nach 

 demselben verarbeitet. Die erhaltenen Präparate sind nicht ganz gleich 

 wirksam. Das hängt wahrscheinlich damit zusammen, daß in dem 

 Ausgangsmaterial, d. h. in dem natürlichen Rinderserum der Gehalt 

 an der wirksamen Substanz verschieden sein wird. Auch mögen andere 

 Faktoren die Größe der Ausbeute beeinflussen. 



Bei der Prüfung der Wirksamkeit durch Vermischen mit gleichem 

 Volumen Oxalatplasma schwankten die Gerinnungszeiten zwischen 

 10 Sekunden und 40 Sekunden; nach wenigen Minuten ist das Gerinnsel 

 so fest, daß man das Reagenzglas umkehren kann. Dieses vom größten 

 Teil des Alkohols befreite Präparat behält auch eine längere Reihe 

 von Tagen, besonders wenn es kalt aufbewahrt wird, seine Wirksamkeit. 

 Bei längerem Stehen verliert es dieselbe allmählich infolge von bak- 

 terieller Zersetzung. Wird dieselbe durch Schütteln der Lösung mit etwas 

 Chloroform und Stehenlassen über einer Chloroformschicht verhindert, so 

 behält das Präparat auch in dieser Form, wenigstens mehrere Wochen 

 lang, seine Gerinnung bewirkende Eigenschaft fast unverändert bei. 



