436 E. Wicchmann : Weitere Untersuchungen 



unter dem Einfluß der Kohlensäure Sulfat- Anionen in die roten Blut- 

 körperchen eindringen, erschien es interessant, festzustellen, ob das 

 Anion der Sulfosäurefarbstoffe ebenfalls imstande ist, unter dem Einfluß 

 der Kohlensäure in rote Blutkörperchen einzudringen. Der Ausfall 

 dieser Versuche erschien ferner wichtig in Hinblick auf die von Höber 1 ) 

 angestellten Untersuchungen über die Kataphorese der Blutkörperchen, 

 aus denen ebenfalls geschlossen werden muß, daß die mit Kohlensäure 

 behandelten Blutkörperchen für SO^ permeabel sind. 



Zunächst wurde in den Versuchen das Blut nicht besonders mit 

 Kohlensäure behandelt, sondern es wurde das auf dem üblichen Wege 

 aus der Vene entnommene Blut verwandt. Im einzelnen gestaltete sich 

 die Versuchsanordnung folgendermaßen: Das Blut wurde in dem 

 Zehntelvolumen einer 5proz. Natriumcitratlösung aufgefangen und in 

 zwei Teile geteilt. Die eine Portion wurde nicht weiter behandelt; durch 

 die andere wurde 30 Minuten lang ein kräftiger Sauerstoffstrom geleitet, 

 um die Kohlensäure auszutreiben. Dann wurden die Blutkörperchen 

 beider Portionen 4— 5 mal mit isotonischer Kochsalzlösung gewaschen, 

 je nachdem die Waschflüssigkeit noch eine Eiweißreaktion gab oder 

 nicht. Die Farbstoffe — Cyanol extra (Cassella & Co.), Lichtgrün FS 

 (Grübler & Co.), Ponceau 2 R (Höchst) und Setopalin (Geigy) — wurden 

 in einer isotonischen Natriumsulfatlösung gelöst. Von dieser Farbstoff - 

 Natriumsulfatlösung und dem gewaschenen Blutkörperchenbrei beider 

 Portionen wurden gleiche Volumina miteinander gemischt, und diese 

 Suspensionen nach gutem Umschütteln für 2 Stunden in den Eisschrank 

 (durchschnittliche Temperatur + 3°C) gestellt. Nach Ablauf der zwei 

 Stunden wurde zentrifugiert. Auf das sorgfältigste wurde darauf 

 geachtet, daß das Zentrifugat absolut ldar war. Um das zu erzielen, 

 wurden zum Zentrifugieren enge Röhren benutzt. Die Farbstoff- 

 konzentration der Zwischenflüssigkeit wurde aus äußeren Gründen 

 nicht wie bei den früheren Versuchen mit einem Krüss sehen, sondern 

 mit einem Autenrieth sehen Colorimeter bestimmt. Da nach meinen 

 Erfahrungen die kleinen Keile des Autenrieth sehen Colorimeters unter 

 einander von sehr verschiedener Größe sind, wurde zu der Bestim- 

 mung immer dasselbe Paar von Keilen verwandt. Zur Ablesung 

 für das Colorimeter stellte ich mir aus bestimmten Farbstoff Ver- 

 dünnungen eine Ablesungskurve her, bei der in der Abscisse die Farb- 

 stoffkonzentrationen, in der Ordinate die Skalenteile des Colorimeters 

 standen. Die Verdünnung, die durch die den Blutkörperchen an- 

 haftende Flüssigkeit eingetreten war, wurde mittels Hämatokriten 

 bestimmt. 



*) Höber, Pflügers Arcli. f. d. ges. Physiol. 101, 627. 1904 und 102, 196. 1904. 

 — Biochem. Zeitschr. 19, 494. 1909. — Musikalische Chemie der Zelle und der 

 Gewebe. Leipzig u. Berlin 1914, S. 601. 



