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restent vivants à 37 degrés, vingt-quatre, trente-six heures dans le sang 

 citrate ; quarante-huit heures dans du bouillon avec organe frais ; un 

 peu plus dans l'ascite simple ou dans l'agar-ascite ; quinze à vingt jours 

 dans l'ascite -f- organe frais -f- huile de vaseline. 



Dans ce dernier milieu, on trouve immédiatement après l'ensemencement 

 4-5 spirilles par champ microscopique ; 1b -20 après vingt-quatre heures, 

 jusqu'à 30, et même plus les trois jours suivants ; ils ont tous conservé leurs 

 mouvements caractéristiques et ont gardé l'aspect qu'ils ont in vivo; ils sont 

 cependant moins longs, présentant en général 7-12 spires, assez souvent 

 3-6 seulement et très rarement jusqu'à 16 ou plus. Le premier jour, on les 

 trouve isolés, répandus dans toute la hauteur du liquide et surtout autour du 

 fragment de rein: les jours suivants, quelques-uns s'agglutinent par petits 

 amas. Au fur et à mesure que la culture vieillit, il semble que les spirilles ont 

 tendance à monter vers les couches supérieures du milieu, de sorte que, après 

 le dixième jour et même plutôt, il n'y a que des cadavres au fond du tube. 

 Dès le cinquième jour dans quelques cultures, dans d'autres même avant, 

 un certain nombre de spirilles se présentent sous une forme plus ou moins 

 déformée, moins régulière, plus épaisse, un peu granuleuse ; parmi ces 

 derniers, il y en a qui ont perdu en partie leurs mouvements et qui ne bougent 

 que sur place; il y en a aussi d'immobiles, des cadavres à peine reconnais- 

 sablés. Le nombre de ces cadavres augmente rapidement les jours suivants, 

 de sorte que nos cultures étaient mortes vers le douzième jour ; ce n'est que 

 rarement que certaines d'entre elles cnt résisté jusqu'au quinzième jour ; une 

 seule a dépassé le vingtième. 



Nous avons obtenu des sous-cultures dans le même milieu, en partant 

 des cultures qui nous ont semblé les plus abondantes, vieilles de quatre 

 à sept jours. Nous sommes arrivés jusqu'au cinquième passage. 



Les spirilles de nos deux premiers passages, dans quelques tubes du 

 moins, étaient aussi nombreux et gardaient le même aspect que ceux 

 des cultures initiales ; plus de la moitié des tubes du deuxième passage 

 sont restés ou stériles ou très pauvres en spirilles ; les trois quarts parmi 

 ceux du troisième ont eu ïe même sort ; deux seulement des douze de la 

 quatrième série ont été fertiles; aucun dans la cinquième. Dans les 

 derniers passages, les cultures ont été de moins en moins abon- 

 dantes. 



En résumé, nous croyons pouvoir affirmer que les spirilles de la poule 

 peuvent pulluler in vitro à 37 degrés dans le milieu indiqué par 

 Nogouchi (ascite non filtrée -f- rein frais de lapin). Parmi les liquides 

 d'ascite fournis par différents malades souffrant de la même maladie 

 (cirrhose du foie), il y en a qui se montrent plus favorables au dévelop- 

 pement des spirilles, fait observé d'ailleurs par Nogouchi lui-même. 



Les cultures ne sont pas très abondantes, sont assez difficiles à obtenir 

 et plus difficiles encore à entretenir. Le procédé est donc peu pratique, 



