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Nous avons également constaté que les sels biliaires étaient énergique- 

 ment fixés par le charbon animal, d'oùilétaitpossibledeles extraire par un 

 dissolvant approprié (l'alcool plus ou moins concentré), à tel point qu'il 

 suffisait d'évaporer sur une petite quantité de charbon (5-10 gr. pour un 

 litre) une urine riche en acides biliaires, de laver ensuite le résidu avec 

 de l'eau froide pour éliminer l'urée et les sels, puis d'épuiser par 

 l'alcool pour obtenir dans ce dernier liquide la totalité des acides ou 

 des sels biliaires contenus dans l'urine examinée. 



L'expérience nous ayant montré que cette méthode simple n'était pas 

 d'une application suffisamment générale, nous avons cherché à mettre 

 simultanément à contribution l'entraînement des dérivés cholaliques 

 par divers précipités, et leur fixation par le charbon. 



Les précipitations qui réalisent le plus complètement l'entraînement 

 des acides biliaires sont celle que fournit l'acide phosphotungstique en 

 présence de HCI, et celles qui sont données par les sels ammoniacaux, le 

 sulfate en particulier. Nous nous sommes arrêté à l'emploi de ce 

 dernier réactif. 



Technique. — 200 ce. d'urine non filtrée, introduits dans un matras, sont 

 additionnés de 2 ce. d'acide acétique- cristallisante et de 140 grammes de 

 sulfate d'ammoniaque ordinaire. L'essai est mis au bain-marie jusqu'à disso- 

 lution du sel, et le liquide est ensuite versé dans une éprouvette et abandonné 

 à lui-même pendant vingt-quatre heures. On provoque ainsi la précipitation 

 d'une partie du pigment normal et de la (otalité des pigments anormaux 

 ainsi que des acides biliaires. On sépare le précipité, de préférence par centri- 

 fugation. Dans le cas où l'on serait obligé de recourir à la filtration, nous 

 conseillons d'opérer celle-ci sur un disque perforé relié au vide par un dispositif 

 approprié, et recouvert de pâte de papier par filtration préalable du liquide 

 obtenu en malaxant du papier à filtre dans de l'eau tiède. La filtration par le 

 vide, sur un disque ainsi préparé, s'effectue d'une façon très régulière. 



Le précipité recueilli par l'un ou l'autre procédé (centrifugation ou filtra- 

 tion) est lavé avec un peu de solution saturée de sulfate d'ammoniaque, puis 

 essoré le plus complètement possible, séché et épuisé ensuite par l'alcool à 

 95 degrés bouillant qui enlève les acides biliaires et une partie des pigments. 

 La solution alcoolique est évaporée sur 2 grammes de charbon animal et le 

 résidu est ensuite épuisé à froid par l'alcool à 50 degrés. Cette dernière 

 solution évaporée laisse un résidu sur lequel on peut caractériser les acides 

 biliaires par leurs réactions physiques (A) ou leurs réactions chimiques (B). 



(A) On constate (et mesure au b'esoin) l'influence sur la tension superficielle 

 en dissolvant le résidu dans un peu d'eau ammoniacale, évaporant de 

 nouveau à sec, reprenant par 20 ce d'eau (soit un 10 e du volume d'urine 

 primitif) et effectuant l'épreuve au compte-gouttes de Duclaux, par compa- 

 raison avec une solution titrée de glycocholate de soude. 



(B) L'identification chimique se fera par une des réactions des acides 

 biliaires, la réaction de Pettenkofer en particulier. 



La réaction de Pettenkofer s'obtiendra de préférence en traitant une 

 proportion connue du résidu par 2 ce d'acide sulfurique contenant un 



