SÉAiNCE DU. 18 FÉVRIER 



•dément lavée à l'eau bouillante. Le milieu clarifié, réparti dans 

 des tubes, à raison de 10 c.c. environ, est mis à refroidir aux en- 

 virons de 5o°. C'est alors qu'est ajouté l'acide citrique, en solu- 

 tion stérile, à 10 p. 100, à l'aide d'une pipette graduée en dixiè- 

 mes de centimètre cube. Dans chaque tube on laisse tomber o,5 

 ce. de liqueur acide, on mélange rapidement et on incline. La 

 transparence du milieu est à peine troublée. La gélose citrique 

 à 5 p. 1.000 es.t d'ordinaire la plus favorable, cependant lors- 

 qu'on est en présence d'une flore riche en Bactéries du type coli, 

 supportant assez bien la réaction acide, la teneur de 8 ou io 

 p. i.ooo arrête plus sûrement le développement bien qu'elle gêne 

 un peu le développement végétatif des moisissures. 



III. Pour isoler les germes de Champignons contenus dans un sol 

 ou tout autre matériel donné, on procède comme pour les Bactéries : 

 dilutions aqueuses successives (le plus souvent de i/5oooà i/ioooo), 

 ensemencement de tubes de gélose citrique, répartition en plaques 

 de Pétri. Après solidification, chaque boîte est retournée pour 

 éviter le contact de l'eau de condensation. On abandonne à une 

 température de 27 à 28 . En 2/i heures, déjà apparaissent de 

 fines colonies duveteuses blanches, parfaitement isolées si la dilu- 

 tion a été convenable. Au bout de /j8 heures, la fructification est 

 parfois suffisamment avancée pour permettre le repiquage sur 

 tubes inclinés, etc. Les espèces les plus communes sont des types : 

 Mucor, Rhizopus, Pénicillium, Aspergillus, Sclerotinia et autres 

 non déterminées. Dans ces conditions d'acidité du milieu, ne se 

 développent que très exceptionnellement de rares colonies bacté- 

 riennes, au moins dans les tout premiers jours, car plus tard, au 

 fur et à mesure que l'acide citrique est oxydé par les moisissures, 

 on voit apparaître, toujours en petit nombre, des Bactéries et fré- 

 quemment un Cladothrix sp. très commun ici. 



Conclusions: Cette technique permet aisément l'isolement des 

 Champignons. L'acide citrique présente un double avantage : 

 i° il constitue, pour ces organismes, un aliment de choix (rem- 

 plaçant les hydrates de carbone proprement dits) , facilement at- 

 taquable en raison de la fonction alcool ternaire en position y 

 dans la molécule ; 2 l'acidité qui pourrait être sans doute obte- 

 nue par d'autres acides organiques (acide tartrique Baulin) arrête 

 provisoirement l'évolution des Bactéries, permettant seul le rapide 

 développement des diverses espèces de Champignons, facilitant 

 par suite leur étude et faisant entrevoir la possibilité d'une pré- 

 paration pratique de certains d'entre eux, en particulier du Péni- 

 cillium glaucum qui a une application si importante dans l'indus- 

 trie fromagère. 



(Institut biologique de Rio-de-Janeiro). 



