SÉANCE DU 18 FÉVRIER '339 



de ce voile grisâtre, pour en vérifier la nature et faire les repi- 

 quages convenables sur gélose citrique d'abord et ensuite sur mi- 

 lieux habituels. Le plus souvent, les levures s'obtiennent pures, 

 surtout dès les premières heures de fermentation. Les Bactéries 

 sont extrêmement rares. 



Il est facile, dans les prélèvements, d'éviter les Champignons 

 en petites houppes et non fructifies. Plus tard, cependant, étant 

 données les larges surfaces en contact avec l'air, les moisissures 

 consomment l'acide citrique et favorisent par suite le développe- 

 ment progressif des Bactéries. La fermentation alcoolique se ter- 

 mine parfois en une fermentation acétique. 



II. L'isolement des levures contenues dans les végétaux, à la 

 surface des fruits est des plus simples. Dans un tube à essai sté- 

 rile on fait tomber un fragment de végétal, un morceau de fruit, 

 puis avec une pipette à boule on verse du bouillon sucré citri- 

 que à i5 p. 1.000 jusqu'à 2 cm. environ au-dessus du matériel 

 solide. Au bout de 48 heures s'établit la fermentation alcoolique; 

 bientôt les bulles de CO 2 viennent éclater en surface entraînant 

 les levures qui forment rapidement un voile, grimpant même as- 

 sez haut, sur les parois du tube. La plus grande partie de ces 

 éléments cellulaires cependant s'agglomèrent au fond du bouillon 

 sous la forme ordinaire de précipité grisâtre. Les prélèvements 

 faits dans les premières heures de l'existence du voile donnent 

 généralement déjà des cultures pures ; en tout cas, on obtient 

 l'isolement définitif en repiquant sur milieux solides sucrés ci- 

 triques. La présence de quelques houppes de Champignons ne 

 gêne pas, elles peuvent être écartées préalablement et même en- 

 levées à l'aide de l'anse de platine. 



III. La numération des levures dans un milieu donné exige 

 l'emploi de milieux semi-fluides indiqués par le P r J. Lignières (1) 

 en dissolvant o,2 5 gr. de gélose dans 100 ce. de bouillon sucré. 

 On ajoute l'acide citrique pendant le refroidissement. La gélose 

 ensemencée avec une dilution convenable est versée sur plaque 

 de Pétri, bien répartie et laissée en place en raison du peu de 

 consistance du gel. Les colonies apparaissent dans les 36 heures 

 avec leurs caractères classiques, petites taches rondes ou ellipti- 

 ques, de consistance homogène, de coloration blanchâtre, puis 

 grisâtre. 



Conclusions. Cette technique nous a permis de retrouver et 

 d'isoler plusieurs variétés de levures des échantillons déterre 

 envoyés au laboratoire pour analyse chimique et bactériologique. 

 De la même manière, ont été séparées à l'état pur les levures de 



(1) Des milieux semi-fluides dans la culture des anaérobics. Bulletin de 

 VAcad. de méd., ik octobre 1919. 



