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Les auteurs japonais emploient des milieux solides au sang et des 

 milieux liquides additionnés de sérums sanguins divers. Reiter et 

 Ramme se sont servis d'eau physiologique additionnée de divers 

 sérums. C'est le sérum de lapin qui leur a paru le meilleur. 



Les tentatives de culture en milieux solides (gélose au sang) ou demi- 

 solides (gélatine et sang) ne nous ont pas donné de résultats, quelles 

 que soient les proportions des deux substances et malgré la présence ou 

 l'absence d'huile de vaseline à la surface. 



Les essais de culture en milieux liquides ont, au contraire, réussi, 

 mais, ignorant la teneur en sel marin de l'eau physiologique ainsi que 

 la proportion exacte des mélanges, nous avons tâtonné quelque temps. 

 Pour notre part, nous avons utilisé des mélanges de sérum, soit avec 

 l'eau physiologique contenant 8,5 pour 1.000 de chlorure de sodium, 

 soit avec le liquide de Locke. 



Les milieux qui ont fourni les meilleurs résultats sont les suivants : 



L — Sérum de bœuf-eau physiologique. Diluer 1 ce. de sérum de 

 bœuf chaufFé à 56° dans 9 c. c. d'eau physiologique à 8,5 p. 1.000. 

 Ensemencer avec du sang du cœur ou avec de la pulpe hépatique; 

 recouvrir d'huile dé vaseline. Cultiver entre 23° et 33°. On obtient par 

 ce procédé des cultures assez riches en 8 à iO jours. Le maximum 

 s'observe vers le lO*" jour. En trois semaines, la culture est terminée. 

 Tout liquide contaminé est absolument impropre à la culture. 

 - II. — Sérum de lapin-eau ])hysiologique. Diluer 1 c. c. de sérum de 

 lapin dans 5 ce. d'eau physiologique à 8,5 p. 1.000. Ensemencer avec 

 du sang du cœur ou avec de la pulpe hépatique. Recouvrir d'huile de 

 vaseline. Les premières cultures se développent mieux entre 23° et 25°; 

 une fois l'adaptation faite, le développement peut être obtenu à 33°. Les 

 Spirochètes apparaissent en pleine multiplication vers le 12^ jour dans 

 les deux premiers passages ; au cours des suivants, en Â ou 6 jours, on 

 a des cultures en pleine évolution. Celles-ci se conservent environ trois 

 semaines à 23°. Le microbe se _pultive plus rapidement à 33° ; mais il 

 meurt en 15 jours. Les passages se font bien. Le sixième repiquage est 

 actuellement en plein développement. La virulence persiste. Le qua- 

 trième repiquage a tué le cobaye en 6 jours, à la dose de 0,5 c. c. dans 

 la cavité péritonéale. 



III. — Liquide de Locke et sérum de bœuf. Diluer i ce. de sérum de 

 bœuf chauffé à 56° dans 9 c. c. de liquide de Locke. Ce milieu est placé 

 après ensemencement à l'étuve à 35°. Après 6 jours, on compte 60 à 

 70 Spirochètes par chanip microscopique. Nous avons obtenu les cul- 

 tures les plus abondantes en ensemençant avec de la pulpe hépatique. 

 Le liquide des tubes doit être recouvert d'une mince couche d'huile 

 de vaseline stérilisée. Les ensemencements de ce même milieu avec du 

 sang fournissent des résultais inconstants. Les Spirochètes cultivés 

 ainsi n'ont pas poussé dans les repiquages faits dans le liquide de 



