SÉANCE DU 31 MARS ^31 



le tout en boîte de Pétri comme s'il s'agissait de cultiver un liquide 

 céphalo-rachidien total. Les colonies obtenues servent ensuite à fabri- 

 quer une émulsion pour épreuves d'agglutination. 



{Travail du Laboratoire de Bactériologie du V" Arrondissement maritime.) 



Procédé de coloration des granulations polaires 

 du bacille diphtérique, 



par L. Tribondeau et J. Dubreuil. 



Nous signalons ce procédé parce qu'il a le double avantage d'être d'une 

 exécution rapide et d'utiliser un colorant couramment employé dans 

 les laboratoires de bactériologie pour la coloration de Gram : le cristal 

 violet phéniqué. 



Émulsionner sur lame porte-objets une parcelle de colonie de bacilles 

 diphtériques dans une gouttelette d'eau distillée; étaler; laisser sécher; 

 fixer à l'alcool absolu. — Colorer pendant environ cinq minutes au 

 cristal violet phéniqué. — Laver à l'eau ordinaire. — Faire agir une 

 solution de vésuvine à 1 p. 500 jusqu'à ce que la coloration du frottis 

 passe du violet au brun (une à deux minutes, suivant son épaisseur). — 

 Laver à l'eau ordinaire; sécher. 



Examiner à l'immersion. Les granulations polaires, d'un beau violet 

 noir, tranchent vigoureusement sur le corps jaunâtre des bacilles. 



IS. B. — Nous préconisons, pour la fabrication de la solution de 

 cristal-violet phéniquée, la technique suivante. Broyer 1 gramme de 

 cristal violet dans un mortier ; ajouter 2 gr. 80 d'acide phéniqué 

 neigeux; triturer; laisser liquétier pendant quelques minutes. Mesurer 

 10 c. c. d'alcool éthylique absolu dans un récipient gradué ; en verser une 

 partie dans le mortier et broyer de nouveau pour achever de dissoudre 

 colorant et acide phéniqué. Transvaser la solution obtenue dans un 

 tlacon. Se servir du reste de l'alcool, puis de 90 ce. d'eau distillée (par 

 fractions) pour bien rincer le mortier; recueillir tout le liquide de rin- 

 çage dans le flacon; bien agiter. Avoir soin de filtrer le colorant sur 

 papier quand on le verse du flacon de réserve dans les flacons compte- 

 gouttes en service. 



[Travail du Laboratoire de Bactériologie du V^ Arrondissement marilime.) 



