SÉANCE DU 2i NOVEMBRE S<S1 



réactif qui a Vavanlage de faire partie de .tous les nécessaires de bactério- 

 logie. 



Technique. — Diluer sur lame dans un peu d'eau une parcelle de la 

 colonie microbienne à colorer. Étaler l'émulsion obtenue. Laisser sécher. 



Saisir la lame avec une pince et fixer très énergiquement le frottis 

 par la chaleur, en écrasant, à 6 ou 10 reprises, la flamme d'un Bunsen 

 suivant le procédé classique. Attendre que la haute température de la 

 lame soit tombée. 



Mordancer en couvrant le frottis d'une bonne couche de Lugol et en 

 chauffant jusqu'à franche émission de vapeurs à 2 ou 3 reprises (attendre 

 la cessation des vapeurs dans les intervalles). Laver à l'eau ordinaire. 



Couvrir de cristal violet phéniqué et chauffer -1 ou 3 fois jusqu'à 

 franche émission de vapeurs, comme avec le Lugol. Lav'er à l'eau ordi- 

 naire. 



Couvrir de vé.suvine en solution aqueuse à 1 p. 500. Laisser agir de 

 1 à 2 minutes. Laver brusquement à l'eau ordinaire. Sécher. 



Les spores se détachent en violet foncé sur le corps jaune brun des 

 bactéries. 



iY. B. — Plus les spores sont denses, plus le colorant les pénètre 

 difficilement, et plus il est nécessaire de les chauffer au moment de la 

 fixation; encore faut-il ne pas oublier qu'un chauffage excessif altère 

 les corps microbiens. 



Pour fabriquer rapidement la solution de Lugol, je conseille de dis- 

 soudre l'iodure de potassium (2 gr.) dans 10 ce. seulement d'eau dis- 

 tillée, puis de dissoudre l'iode métallique (1 gr.) dans cette solution 

 concentrée d'iodure; on complète ensuite à 300 ce. avec de l'eau dis- 

 tillée. 



Le cristal violet phéniqué sera fabriqué d'après la formule que j'ai 

 indiquée à propos des granulations polaires. 



Il est possible d'obtenir des spores colorées en rouge et des bacilles 

 bleus en substituant le Ziehl au cristal violet après mordançage par le 

 Lugol; OH différencie dans ce cas avec l'alcool absolu, et on termine en 

 colorant avec une solution aqueuse de bleu de méthylène médicinal pur 

 à 1 p. 300 (15 secondes environ). Les images sont phis eiassiques, mais 

 l'intensité de coloration des spores est moindre qu'avec le cristal violet. 



[Laboratoire de Bactériologie du V" arrondissement maritime.) 



Biologie. Comptes rendus. — 1917. T. LXXX. 64 



