SÉANCE DU l*"'" MARS 207 



qui nous a paru la plus simple et la plus constante dans ses résultats 

 consiste à préparer une dilution au 1/lOderémulsion type avec la solu- 

 tion suivante : 



Formol iO ce. 



Bleu de méthylène à 1/100 4 c. c. 



Sérum physiologique 10 ce. 



On examine la dilution à la cellule de Thoma, en ayant soin d'at- 

 tendre au moins une heure pour que les microbes aient perdu une 

 partie de leur mobilité, pour qu'ils se colorent et se déposent autant 

 que possible au fond de la cellule ; on compte alors plan par plan en 

 mettant en œuvre toutes les ressources optiques de l'éclairage du 

 microscope. Si l'on n'observe pas rigoureusement cette technique, on 

 s'expose à de sérieux mécomptes. 



Voici maintenant quelques-uns des résultats obtenus avec deux 

 échantillons difTérents de l^acilles : 



1° Les microbes provenant d'une culture sur gélose de 24 heures en 

 émulsion dans le sérum physiologique tuent le cobaye en injection 

 sous-cutanée à une dose supérieure à 40 millions de bacilles qui paraît 

 être la dose limite. 



2° Une émulsion dosée à 40 millions de bacilles, mais laissée exposée 

 24 heures à la température du laboratoire et à la lumière diffuse du 

 jour, tue constamment le cobaye en 24 heures. Voici l'explication de ce 

 fait : une seconde numération nous a montré que l'émulsion vieille de 

 24 heures contenait 250 millions au lieu de 40 millions de bacilles. Le 

 microbe ayant poussé dans le sérum physiologique, l'énorme différence 

 du pouvoir pathogène ''ne peut être imputée exclusivement à une 

 augmentation de la virulence. 



3° Si on lave les bacilles émulsionnés et si on n'injecte en dernier lieu 

 que des bacilles bien vivants, les corps morts, étant éliminés par une 

 centrifugation partielle (vaccin Nicolle, Conor et Conseil), la dose com- 

 patible dans ces conditions avec la survie de l'animal est bien supérieure 

 à 40 millions de bacilles. Ce fait peut être interprété comme une dimi- 

 nution de la virulence ou du pouvoir pathogène. 



4° Si on prépare une émulsion analogue au vaccin de Besredka en 

 agglutinant les microbes par un sérum spécifique et en les lavant 

 ensuite pour éliminer l'excès de sérum on peut injecter dans ce cas une 

 dose supérieure à 40 millions de bacilles; la virulence paraît nettement 

 diminuée, car avec la dose limite ordinaire on ne trouve plus au bout de 

 15 jours de bacilles dans la rate. 



5° Si on change la nature de l'excipient et si on injecte, au lieu d'une 

 émulsion aqueuse, une culture fraîche en bouillon de 24 heures, la dose 

 de 40 millions de bacilles n'est plus compatible avec la vie. Il y a don"b 

 augmentation soit de la virulence, soit du pouvoir pathogène. 



