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nettement supérieur aux bouillons classiques qui nous servaient de 

 témoins. 



Par contre, des bouillons préparés directement avec des os ou de la 

 moelle osseuse nous ayant donné des résultats encourageants, nous 

 avons cherché à déterminer les conditions de préparation correspondant 

 au meilleur développement du streptocoque. Pour nous en rendre 

 compté, nous avons fait l'examen microscopique comparatif des diverses 

 cultures à intervalles réguliers. 



La mesure de l'abondance des germes pouvant difficilement être 

 établie par leur numération avec un organisme de la constitution mor- 

 phologique du streptocoque, nous avons mis à profit la production 

 d'hémolysines dans les cultures du streptocoque pyogène, en comparant 

 le pouvoir hémolysant de cultures, obtenues sur divers milieux, dans le 

 même temps et avec la même souche. Nos cultures vivantes étaient 

 diluées avec du sérum physiologique, dans des proportions variant du 

 1/5 au 1/100 et miàes en présence d'hématies déplasmalisées de lapin, 

 pendant deux heures, à 38°. Le degré de dilution, limite de l'hémolyse, 

 nous fournissait un chiffre représentatif de l'activité vitale du micro- 

 organisme. 



Nous avons ainsi étudié de nombreux bouillons, obtenus de façons 

 différentes. Nous indiquerons seulement le mode d'obtention de celui 

 qui nous adonné les meilleurs résultats. Sa préparation est relativement 

 simple, en même temps qu'il est très économique : 



Concasser grossièrement, au moyen d'un lourd marteau, des os ù 

 moelle crus et peu compacts, côtes de bœuf de préférence. Il n'est pas 

 néce!=saire de les débarrasser complètement des débris musculaires et 

 adipeux adhérents. Mettre en contact : 



Côtes de bœuf concassées 500 grammes. 



Solution normale d'IICl 100 — 



Eau POO — 



Laisser macérer 12 à 2i heures, puis porter à l'autoclave et main- 

 tenir à 125-130° pendant une demi-heure. Après refroidissement com- 

 plet, passer à travers un linge et ajouter au liquide obtenu 15 p. 1.000 

 de peplone. Neutraliser sans filtrer, avec une solution de soude étendue, 

 jusqu'à réaction amphotère. Porter à nouveau à l'autoclave à 125-130° 

 pendant une demi-heure. Filtrer chaud. 



Il est utile de placer ensuite la préparation dans un endroit très frais, 

 pendant un jour, pour provoquer la cristallisation d'une petite quantité 

 de phosphate bicalcique qui précipiterait plus tard, et de filtrer à 

 nouveau. 



Répartir en tubes et stériliser à 120°. 



Ce bouillon, ensemencé avec un pus streptococcique, après six heures, 

 quelquefois en un temps plus court, montre à l'examen microscopique 



