SÉANCE DU 9 MARS 249 



Ces granulations ont été colorées, jusqu'à présent, par des procédés 

 s'inspirant des méthodes de Gram et de Ziehl : coloration simple parle 

 violet phéniqué, ou double par le violet et la fuchsine, fixation par l'iode 

 ioduré, décoloration par les acides et l'alcool. Dans la pratique, les 

 méthodes de double coloration (granulations en noir, corps bacillaires 

 en rouge) sont les plus commodes. Elles sont cependant difficiles à 

 réussir, notamment à cause de l'incompatibilité delà fuchsine par 

 l'iode. 



Nous avons pensé à employer, au lieu de la solution de Lugol, l'acide 

 picrique, qui remplace l'iode dans la méthode de Gram, modifiée par 

 Claudius. L'acide picrique, tout en fixant le violet, a l'avantage de ne pas 

 nuire à l'action de la fuchsine, et a même été utilisé, en solution 

 hydro-alcoolique, par Spengler, dans son procédé de coloration du BK 

 par la fuchsine phéniquée, pour mettre spécialement en évidence les 

 formes longues et peu acido-résistantes du bacille. Ce réactif nous a 

 donc paru convenir aussi bien à la coloration du corps bacillaire par la 

 fuchsine, qu'à celle des granulations par le violet. 



Voici comment nous procédons : 



i. Étaler en couche mince , sur lame, une parcelle purulente du crachat à 

 analyser. Sécher. 



2. Fixer par l'alcool absolu (une minute) et flamber. L'alcool est préférable 

 à la chaleur seule et assure une coloration plus régulière. 



3. Colorer à chaud, pendant 2-3 minutes, ou à froid et en espace clos, pen- 

 dant J5-30 minutes, par un mélange préparé extemporanément de trois par- 

 ties de fuchsine de Ziehl et de deux parties de violet de gentiane phéniqué 

 (pour une plaque, quinze gouttes de fuchsine et dix gouttes de violet). 



4. Égoutter et remplacer le colorant par l'alcool picrique de Spengler, 

 pendant une minute, à froid (Sol. aq. saturée d'acide picrique 60, alcool 40}. 



5. Remplacer l'alcool picrique par de l'alcool à 60°. Laver trois fois de suite 

 la plaque au moyen de cette solution. 



6. Décolorer, pendant vingt secondes, par l'acide nitrique au sixième. 



7. Décolorer par l'alcool à 60°. 



8. Colorer le fond de la préparation par l'alcool picrique, pendant une 

 minute. 



9. Laver à l'eau, sécher, monter. 



Les bacilles de Koch sont roses, les granulations de Much, noires, le 

 restant de !a préparation, jaune pâle, 



[Laboratoire de recherches cliniques 

 de l'Hôpital militaire belge Cabour, 1917.) 



BiOLOGiE. Comptes rendus. — 1918. T. LXXXt. 18 



