SÉANCE DU 23 MARS 305 



des hémolysines : c'est que le titre des sérums préparés ne dépend chez 

 les lapins que fort peu des doses injectées (1), mais surtout des indivi- 

 dualités des animaux. 



Procédé de coloration des Spirilles par le violet formolé. 

 Note de P. Spehl, présentée par J. Jolly. 



La colorabilité des spirilles de Vincent par le violet de gentiane 

 phéuiqué nous a incité à rechercher dans quelles conditions le violet 

 de gentiane pouvait se fixer sur les autres formes spirillaires. 



Ayant remarqué que, comme mordant, le formol convenait mieux 

 que l'acide phénique, nous avons utilisé, dans nos recherches, le violet 

 formolé employé parfois en histologie (violet de gentiane, 1; formol, 4; 

 alcool, 10; eau distillée, q. s. p. 100). Dans le but de renforcer encore 

 le pouvoir colorant de cette solution, nous avons employé trois moyens: 

 1° le mordançage .préalable par le mordant contenu dans la solution 

 colorante elle-même (formol), procédé comparable au mordançage par 

 l'alun de fer dans la coloration par Fhématoxyline ferrique ; 2° un mor- 

 dançage supplémentaire par l'acide chromique (réactif précipitant d'ail- 

 leurs le violet en noir) ; 3° l'action de la chaleur qui est un procédé 

 général d'intensification des colorants. 



Voici la technique à laquelle nous nous sommes arrêté : 



1. Etalement sur lame en couche très mince. Sécher. 



2. Formol acétique de Ruge (formol, 2; acide acétique, i; eau distillée, 

 q. s. p. iOO), pendant 5 minutes à froid. Renouveler, ensuite, 2 fois, ce mor- 

 dançage. 



3. Remplacer le formol acétique par une solution aqueuse d'acide chromi- 

 que à 10 p. iOO. Laisser en contact 10 minutes. 



4. Laver la préparation à l'alcool absolu. Faire agir l'alcool pendant 

 2 minutes et flamber. 



5. Colorer par le violet de gentiane formolé pendant 2 minutes, à chaud. 



6. Laver rapidement à l'eau. 



7. Noircir le violet par la solution de Lugol, pendant o minutes. 



8. Laver, sécher à froid, monter. 



Par ce procédé, les éléments cellulaires sont fortement colorés en 

 violet (protoplasme) et en noir (noyau). Les bactéries sont noires. Les 

 spirilles sont violets ou le plus souvent noirs, même ceux qui, comme 



- (i) J'obtiens actuellement avec des doses répétées de 3-J-2-J-1 ce. de glo- 

 bules purs des sérums aussi forts qu'avec 10 ce. 4- 3 ce. -\- 5 ce. et même 

 qu'avec 13 ce. -j- 10 ce -f- S ce que j'injectais auparavant. 



