SÉANCE DU 27 AVRIL 417 



Technique, — 1°- Préparation des réactifs : 



A. — \Test d'épreuve. C'est la gélatine. La grande sensibilité de cette sub- 

 stance aux actions tryptiques l'a fait rejeter par quelques chercheurs. 

 Nous croyons au contraire cette sensibilité favorable à notre étude. De plus, 

 l'appréciation des actions lytiques globales exercées sur la gélatine ne prête 

 à aucune cause d'erreur. Nous verrons plus tard que le mouvement de 

 la digestion peut y être suivi d'une façon très rigoureuse. Nous nous servons 

 d'une gelée à 10 p. 4 00 dans l'eau distillée. Pendant la dissolution (au bain- 

 marie) et la filtration qui suit, il faut éviter toute évaporation. Après filtration 

 on laisse refroidir à 45°, on mesure à cette température le volume obtenu, on 

 neutralise nettement après addition de 15 ce. p. 1.000 de teinture de tour- 

 nesol sensibilisée. 



Pour l'usage, on répartit à 45° dans des tubes à essais à raison de 2 c. c. par 

 tube; on stérilise à 110° pendant 10 minutes. On conserve à l'abri de la dessic- 

 cation. 



Après stérilisation, cette gélatine est limpide, couleur bleu lavande clair, 

 neutre au tournesol, faiblement acide à la phénolphtaléine ; elle contient des 

 traces d'azote titrable au formol. Après liquéfaction à 40°, elle se gélifie en 

 moins de 2 minutes dans la glace fondante. 



B. — Unité tryptique. Elle est telle que Oc. cl de solution liquéfie en 

 1 heure, à 41°, 2 ce. de la gélatine ci-dessus. Cette liquéfaction est incom- 

 plète après une digestion de 45 minutes seulement. Pour apprécier l'état de 

 liquéfaction on plonge les essais dans la glace fondante pendant 15 minutes. 



2° Etablissemeîst de la réaction. — On se sert du sérum de caillot (1) (de 

 24 heures); avant la mise àl'étuve on laisse trypsine et sérum en contact pen- 

 dant 30 minutes à 20°. On mélange dans un bain à 40° et on place les essais à 

 l'étuve. 



Une expérience complète demande, y compris les témoins, 26 tubes renfer- 

 mant, en outre des réactifs en quantité invariable, des volumes de sérum pur 

 depuis ce. 0005 jusqu'à ce 4. Pour les faibles doses on se sert de dilution 

 10—1 et 10—2 dans l'eau physiologique. La digest;ion est- conduite à 41°; les 

 opérations sont faites aseptiquement, cela va de soi (2). 



3° Expression numérique du pouvoir antitryptioue d'un sérum. — 

 Dans les conditions ordinaires, le pouvoir antitryptique du sérum sera 

 mesuré par ses valeurs actives, limites, c'est-à-dire par : 



a) La plus petite quantité de sérum susceptible de provoquer, dans l'unité 

 de temps (/ heure) nécessaire à la liquéfaction de 2 ce. de gélatine prépa- 

 rée, un ralentissement net de V action liquéfiante de la gélatine. 



Cette plus petite quantité active de sérum définit le « seuil » de l'ac- 

 tion antitryptique. 



(1) Sauf pour le sérum d'anguille, pour l'obtention duquel il faut centrifuger 

 le sang immédiatement après la saignée. 



(2) Les essais sont ramenés au volume de trois centimètres cubes par addi- 

 tion d'eau physiologique. 



