SÉANCE DU 11 MAI 491 



sur milieu solide en surface, réalisé de telle sorte qu'il donne naissance 

 à des colonies isolées, doit toujours être simultanément pratiqué. 



I. — Préparation du milieu de culture. Préparer séparément les deux solu- 

 tions suivantes : 



10 Eûu peptonée glucosée (1). 



Eau 100 cent, cubes. 



Peptone Chapoteaut (albumoses et peptone) . . 4 grammes. 

 Sel gr. 50 centigr. 



Alcaliniser (bleuissement léger du papier de tournesol). Porter à l'autoclave 

 15 minutes à 120° pour précipiter, filtrer et ajouter pour 100 c. c. de solution : 



Glucose gr. 20 centigr. 



2° Albumine cVœuf alcaline (2). 

 Mélanger peu à peu, en agitant sans provoquer de mousse : 



Blanc d'œuf 1 partie (en cent. cube). 



Eau distillée. . . ■ 3 parties — 



Deux blancs d'œufs donnent de 200 à 250 c. c. de mélange. 



Ajouter ce. 30 de solution de soude à 10p. 100 pour 100 ce. de mélange 

 d'eau et de blanc d'œuf. Porter à l'autoclave 15 minutes à 115° pour précipiter. 

 Filtrer à chaud. . 



Mélanger les deux solutions précédentes à volume égal. 



Eau peptonée glucosée 30 cent, cubes. 



Albumine d'œuf alcaline — 



Répartir en tubes à essai à raison de 3 ce. de milieu par tube. Stériliser à 

 l'autoclave 15 minutes à 110°. 



II. — Ensemencement. Examen des cultures. Identification. 



La quantité de pus ou d'exsudat. ensemencé sera toujours relativement con- 

 sidérable : à titre d'approximation grossière, de 1/20 à 1/10 de Ce. d'un 

 exsudât, correctement prélevé, contenant de 20 à 40 cocci par champ micro- 

 scopique (objectif à immersion 1/12, oculaire compensateur 4) sur un étalement 

 mince. Après l'ensemencement, agiter le tube pour obtenir un mélange homo- 

 gène. Porter à l'étuve à 37°-38°. Si le résultat doit être connu le plus tôt 

 possible {auiure primitive) vérifier la culture successivement au bout de 4, 6 et 

 8 heures. Dans les autres cas (suture secondaire) il suffit de vérifier la culture 

 une première fois entre la 8' et la 10^ heure d'étuve, mais pas au delà de la 

 10« heure à cause de la pullulation possible ultérieure des autres germes, qui 

 rendrait, dans certains cas, plus difficile la découverte du Streptocoque et, si 

 ce premier examen est négatif, une seconde fois entre la 18*^ et la 24" heure, 

 à titre de contrôle. En pratique, suivant la nature des exsudats prélevés, le 



(1) Truche, Cramer et Cotoni (milieu T). 



(2) Sacquépée et Delater. 



