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Les animaux, inoculés de tissus conservés, meurent plus tardivement, 

 6 à 20 heures plus tard que les animaux inoculés de tissus frais. Résul- 

 tat naturel, car le temps perdu par le tissu conservé représente ici la 

 phase préliminaire de végétation de spores. 



Chez l'animal mort ou sacrifié quand les lésions se montrent suffi- 

 santes, on procède à l'examen direct des tissus : muscles, localement et 

 à distance; œdème; péritoine, etc., afin de se rendre compte de 

 l'aspect des germes, de leur diffusion, de leur nombre, de l'existence 

 ou non de spores. 



Les ensemencements seront pratiqués comme d'ordinaire; ils porte- 

 ront dans tous les cas et au minimum, d'une part sur le sang du cœur, 

 d'autre part sur les tissus infectés les plus éloignés du point d'inocu- 

 lation. S'il existe des spores, il est utile, en outre, de chauffer (par exem- 

 ple 15 minutes à 73°), puis ensemencer le produit chauffé (1). 



Dans ces conditions, on obtient souvent, d'emblée et sans difficulté, 

 des colonies de vibrion septique ou de Bac. hellonensis . Il n'est pas rare 

 que les cultures soient absolument pures. Elles sont habituellement 

 assez nombreuses pour qu'il soit possible de les repiquer sans dif- 

 ficulté. 



Il va sans dire que les colonies obtenues doivent être ensuite véri- 

 fiées à tous égards, sans oublier de vérifier leur action pathogène, de 

 même au besoin que leur sensibilité à l'égard des sérums spécifiques. 



Maturation spontanée, complétée par le chauffage. — Dans certains 

 cas, les cultures donnent un nombre appréciable de bactéries adven- 

 tives, aérobies ou anaérobies. 



Il est nécessaire alors de refaire l'expérience en faisant disparaître 

 au préalable, par chauffage (75°-lo minutes), les formes végétatives 

 aérobies ou anaérobies. Le produit chauffé est ensuite inoculé à l'ani- 

 mal, additionné au besoin de i ce. 5 à 3 ce. de sang défibriné, pour 

 faciliter l'infection. 



Ce pï-océdé de chauffage préalable peut être d'ailleurs substitué au 

 précédent dans tous les cas. Nous insistons seulement sur la nécessité 

 de réduire le chauffage au minimum nécessaire, certaines spores étant 

 détruites ou atténuées par des températures trop élevées. 



Maturation hâtive provoquée. — Ce procédé est moins fidèle que le 

 précédent, par contre il permet d'obtenir des indications moins tar- 

 dives. 



Le muscle est laissé à macérer à l'étuve, dans l'eau physiologique ; 

 les anaérobies pathogènes sporulent dans le muscle même. Après quel- 

 ques jours (2 à 8 joursj, le muscle est dilacéré dans un peu d'eau phy- 



(1) Au chauffage, la macération de muscle se coagule. On évite en partie 

 cette coagulation en ajoutant par centimètre cube de macération 1 goutte 

 (au 50°) de soude à 10 p. 100. 



