SÉANCE DU 8 JUIN 395 



mier temps, on fait agir la base sur le bleu en solution aqueuse. Dans un 

 deuxième temps, on fait agir sur la première solution une autre solution 

 aqueuse d'éosine. Dans un troisième temps, le précipité d'éosinate obtenu est 

 redissous dans l'alcool glycérine. 



D'autres procédés sont à deux temps : la transformation du bleu par la hase se 

 fait en solution aqueuse ; la combinaison du bleu ainsi transformé avec Véosine se 

 fait dans V alcool glycérine. Tel est le cas de l'Azéo que j'ai fait connaître anté- 

 rieurement. Dans un premier temps, on transforme le bleu en solution aqueuse 

 par l'ammoniaque, à chaud, de préférence à 120° à l'autoclave, et on recueille 

 le précipité obtenu qui est de l'azur de méthylène; dans un deuxième temps, 

 on redissout l'azur et l'éosine dans l'alcool glycérine et on combine ces deux 

 solutions (1). 



Par la formule qui en a été livrée à la publicité, le Giemsa appartient à 

 cette catégorie, puisqu'on peut l'obtenir avec de l'azur, préparé à l'avance, 

 qu'on combine avec l'éosine dans de l'alcool glycérine ; mais il est possible 

 que la solution colorante du commerce soit fabriquée autrement. Le procédé 

 de Romanèse est encore à deux temps, mais la transformation du bleu et sa 

 combinaison avec Véosine se font directement dans V alcool glycérine, ce qui évite 

 les manipulations longues et délicates de précipitation préalable des éosinates 

 (premier groupe de procédés) ou d'extraction préalable de l'azur (deuxième 

 groupe). D'après une communication orale, Romanèse transforme dans un 

 premier temps le bleu, en faisant bouillir longuement une solution de ce bleu 

 dans l'alcool glycérine préalablement additionné de carbonate de soude 

 dissous dans un peu d'eau; dans un deuxième temps, il ajoute à la solution 

 précédente une autre solution d'éosine dans l'alcool glycérine et fait, de 

 nouveau, bouillir le mélange. Il rétablit le volume primitif en remplaçant par 

 d'autre alcool celui qui s'est évaporé et laisse mûrir pendant 8 jours environ 

 envase ouvert. Il emploie ce colorant, étendu d'une quantité convenable d'eau 

 froide, sur les préparations de sang préalablement fixées parl'alcool-éther, et 

 termine par un simple lavage à l'eau. 



Le procédé de préparation qui fait l'objet de. cette note réalise le maximum de 

 simplification; il est à un seul temps : la transformation du bleu et sa combi- 

 naison à Véosine se font en même temps, le bleu, la base et Véosine étant tous troi^ 

 dissous ensemble dans Valcool glycérine. On prépare ainsi en moins d'une heure 

 un coloi'ant qui donne d'excellentes préparations, à condition de l'employer 

 suivant certaines règles. En effet, en raison de l'excès de base qu'il contient, 

 surtout les premiers jours, il colore lentement divers détails cytologiques (les 

 granulations de Schûffner par exemple), et surcharge les préparations en 

 bleu. On remédie à ces inconvénients en renforçant son action (emploi d'eau 

 chaude, prolongation de la coloration), et en enlevant après coup l'excès de 

 bleu (lavage au tanin). L'alcalinité du colorant a par ailleurs des avantages 

 précieux : elle permet l'emploi d'eau distillée ordinaire (alors que les colo- 

 rants neutres exigent de l'eau rigoureusement pure et neutre), et elle empêche 

 la précipitation sur les préparations. 



Le colorant se modifie avec le temps; il devient moins alcalin. Il y gagne 



(1) Pour les détails de la préparation, voir : Quelques colorants et procédés 

 de coloration, par L. Tribondeau, Annales de VInstitut Pasteur, août 1917. 



