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100 ce. d"eau alcoolisée lalcool à 90° 1 v. + eau 9 v.). Verser dans le 

 flacon précédent. Dissoudre l'orange el Téosine, pulvérisées ensemble, 

 dans 100 ce. d"eau alcoolisée et verser dans un second flacon. Boucher 

 et laisser déposer quelques heures (une nuit). Décanter les 2 solu- 

 tions dans une capsule en porcelaine oii elles se mêlent. Dans le pre- 

 mier flacon il y a un dépôt de bleu; le reprendre par 50 ce. d'alcool, 

 puis 100 c c. d'eau alcoolisée et décanter dans la capsule. Agiter pour 

 mélanger à l'aide d'une baguette de verre. Placer la capsule sur un 

 bain-marie à niveau constant et laisser chaufl'er jusqu'à évaporation 

 totale (1). Laisser refroidir. Recueillir la couleur par raclage à l'aide 

 d'une lame porte-objet dont on a brisé à la pince les angles d'une 

 extrémité, ou de tout autre instrument approprié en verre et non en 

 métal. Pulvériser et parachever la dessiccation en plaçant à l'étuve à 

 37°, pendant 1 heure sur une feuille de papier blanc. Mettre en flacon 

 sec, étiqueter « N° 1 ». Rendement approximatif, 6 gr. 80 à 7 gr. 



Préparation du « iV" 2 ». — La transformation du bleu de méthylène 

 en azur et en violet de méthylène est obtenue par l'action à chaud du 

 carbonate de soude (utilisé dans la préparation du Leishman). Il faut 

 2o gouttes normales d'une solution aqueuse au 1/100 de carbonate de 

 soude desséché pour transformer 10 centigrammes de poudre « P\° 1 » en 

 « />'° 2 ». Donc, peser 3 gr. 40 de « N° 1 », dissoudre soigneusement 

 dans 200 c. c. d'alcool à 90^ Décanter, reprendre la poudre restée inso- 

 luble par 300 c. c. d'eau alcoolisée (1 : 9), verser le tout (d'un volume 

 global de 500 c. c, quantité nécessaire pour régler le temps de la chaufle) 

 dans une capsule en porcelaine. Mesurer 42 ce. de la solution de carbo- 

 nate, verser dans la capsule et mélanger intimement avec un agitateur 

 en verre. Opérer, pour le reste de la préparation, comme pour le 

 « N° 1 », soit : chauffer au bain-marie jusqu'à dessiccation parfaite, 

 racler le précipité, pulvériser, étendre sur papier dans l'étuve, mettre 

 en flacon poudrier, étiquetera' N°2». Dès leur obtention, les 2 colo- 

 rants sont prêts à l'usage. 



Grâce au bleu de toluidine, l'application successive du « N" 1 » et du 

 « N° 2 » donne des colorations plus variées, plus électives, plus fines 

 que, dans les mêmes conditions, les éosinates de bleu de méthylène 

 seul. Par contre, le bleu de toluidine, sans correctif., a la tendance de 

 trop uniformiser le coloris où prédomine le violet. L'orange G corrige 

 cet inconvénient en donnant aux globules rouges une teinte gris ardoisé 

 paie : sur ce fond neutre les hématozoaires ressortent avec une telle netteté 

 que la « lecture » de la préparation est aisée et rapide. 



Préparation des solutions colorantes. — Les poudres « N" 1 » et 

 « >;° 2 » sont dissoutes à la dose de gr. 50 p. 100 dans un liquide lixa- 



[1) Durée approximative de l'oprralion : 4 heures. 



