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Coloration. 



Le bacille diphtérique se colore par la méthode de Gram ; il faut tou- 

 jours pratiquer cette coloration. 



Si l'on emploie des colorants faibles, le bacille diphtérique pré- 

 sente des points qui prennent fortement la couleur. Ces points sont 

 situés aux deux extrémités, parfois il en existe aussi au centre, le 

 microbe au pourtour de ces corpuscules se colore mal. Ces granula- 

 tions peuvent être mises en évidence par de nombreux procédés de 

 coloration. Les grains existent toujours chez le bacille diphtérique; ils 

 manquent ou sont unipolaires chez les non-diphtériques. La recherche 

 des granulations a rendu plus facile la différenciation des microbes; 

 mais il existe d'autres techniques qui sont plus sûres pour l'établir. 



Le bacille diphtérique, teinté parla méthode de Gram, perd la colora- 

 tion violette si l'on fait agir longtemps l'alcool acétone au 1/20, il se 

 décolore aussi si l'on maintient la lame lo minutes dans l'alcool absolu. 

 Les bacilles non diphtériques se colorent au Gram et restent colorés si 

 l'on prolonge l'action de l'alcool acétone ou de l'alcool al^solu. {Ceci 

 nest vrai que pour des cultures sur sérum âgres de 24 à 48 heures.) Un 

 simple examen des colonies et la coloration des bacilles permettent de 

 différencier les bacilles diphtériques d'autres micro-organismes. 



A-t-ou le droit de considérer ces microbes comme n'appartenant pas 

 au groupe des bacilles diphtériques? 



C'est en partant de cultures absolument pures qu'il est possible de 

 démontrer que le bacille diphtérique peut être séparé des autres ; le 

 bacille diphtérique vrai a des caractères que ne possèdent pas les 

 autres microbes poussant sur sérum coagulé en 24-48 heures et se 

 colorant par la méthode de Gram. 



Culture sur gélose profonde glucosée, tournesolée. 



Sur ce milieu le bacille diphtérique pousse sur toute la hauteur du 

 tube, ne végète pas en surface, il attaque le glucose et produit de l'acide 

 qui fait virer au rouge la teinture de tournesol. 



Au contraire le plus grand nombre des^, bacilles dits pseudo-diphté- 

 riques ne poussent pas en profondeur et'donnent à la surface du tube 

 une culture qui prend l'aspect d'un enduit crémeux, ces bacilles n'atta- 

 quent pas le glucose, ne produisent pas d'acide, bien plus ils alcalinisent 

 le milieu qui devient plus bleu que les milieux témoins. 



Il y a toutefois, à notre connaissance, une exception; le B. cutis 

 communis pousse en profondeur et attaque le glucose quoique plus 

 légèrement; il se rapproche donc du diphtérique, tandis que les autres 

 en sont très différents. 



Cette méthode nous permet de séparer irrévocablement certains 



