SÉANCE DU 23 NOVEMBRE 1089 



la formule d'une solution se prêtant à un emploi général en hémato- 

 logie, susceptible d'être longtemps conservée, possédant toutes les pro- 

 priétés indispensables pour une bonne coloration du sang, ainsi que la 

 plus grande variété de nuances en ce qui concerne les indications cyto- 

 logiques (baso, acido ou amphophibie,métachromasie,etc.), et pouvant 

 être préparée très facilement dans n'importe quel laboratoire de micro- 

 biologie. 



Nous avons pensé d'ajouter au bleu de rnéthylène la même quantité de 

 ses dérivés alcalins (azur de méthylène + violet de méthylène) préparés 

 très simplement d'après le procédé de Bernthsen-Mac Neal. En plus, 

 par l'adjonction d'une petite quantité de thionine et de bleu de toluidine 

 à ce mélange, nous augmentons considérablement les propriétés de 

 coloration métachromasique de la solution. Une certaine quantité d'éo- 

 sine complète la série de substances colorantes employées. 



Voici, du reste, notre formule : 



Bleu de méthylène chimiquement pur gr. 20 



Dérivés de bleu de méthylène. . gr. 20 



Thionine gr. 01 



Bleu de toluidine gr. 01 



Éosine française gr. 10 



Alcool méthylique 85 ce. 



Glycérine 20 c. c. 



Acétone 10 ce. 



On commence d'abord par préparer les dérivés alcalins du bleu de méthy- 

 lène (le mélange d'azur de méthylène et de violet de méthylène). On procède 

 Je la manière suivante : 



On fait dissoudre dans deux litres d'eau distillée o grammes de bleu de 

 méthylène (les bleus de méthylène dont cous nous sommes servis étaient 

 de différentes provenances : au commencement de nos recherches nous 

 employâmes le bleu de méthylène médicinal pur, de Merck ; plus tard nous 

 avons employé avec les mêmes résultats différents bleus de méthylène de 

 fabrication française : Maison Poulenc, Saint-Denis, produits R. A. L., etc.). 

 Après dissolution'complète on ajoute 200 ce. d'une solution de carbonate de 

 soude à 2 p. 100. On fait bouillir le tout dans un ballon en verre, à petit feu, 

 pendant cinq heures, au moins, en agitant de temps en temps et en ayant 

 soin de remplacer au fur et à mesure l'eau disparue par évaporation. Après 

 refroidissement, on filtre sur papier Chardin. Ce qui reste sur le fdtre est mis 

 à l'étuve à 37° pour la dessiccation. Après dessiccation, on recueille la poudre 

 qui est le mélange d'azur et de violet de méthylène qu'on emploie pour la 

 solution panchromatique. La quantité d'azur et de violet de méthylène qu'on 

 obtient par ce procédé de 5 gra'mmes de bleu est à peu près de 3 grammes. 

 Avec cette poudre on prépare la coloration suivante. 



On procède de la manière suivante : 



On fait dissoudre dans 75 ce. d'alcool méthylique la quantité de bleu 

 de méthylène d'abord; après dissolution complète on ajoute la poudre 



