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Préparation du colorant mixte. — Mesurer des volumes de bleu Borrel, et de 

 bleu ordinaire à 1 p. 100, ayant entre eux le même rapport que les solutions 

 d'éosinates de mêmes noms dans le mélange optimum fixé par l'essai précé- 

 dent. Combiner chacun d'eux à une quantité appropriée d'éosine à 1 p. 1000, 

 à chaud. Après transvasement dans des verres coniques, sédimentation, et 

 décantage, les deux précipités sont réunis dans un même verre, intimement 

 mélangés, et vidés dans un filtre en papier non plissé. • — Remplir, à deux ou 

 trois reprises, le filtre d'eau distillée pour laver ce précipité mixte. — Le filtre, 

 bien égoutté, est mis à sécher à l'étuve cà 42°. — Une fois sec, le colorant se 

 détache du papier par croûtelles; le réduire en poudre fine, au mortier. 



Colorant bi-éosinate du commerce. — Notre colorant en poudre se 

 livre par doses de gr. 20 enfermées, pour en assurer la conservation 

 parfaite, dans des ampoules de verre privées d'air. Pour l'usage, vider 

 le contenu d'une ampoule dans le mélange: alcool élhylique absolu, 

 60 ce; glycérine neutre, 6 ce. Laisser dissoudre pendant un jour au 

 moins, en agitant de temps à autre; filtrer sur papier. 



II. — Mode d'emploi du colorant. 



Étaler, par les procédés ordinaires, le sang (ou les autres produits 

 tels que : suc chancreux, pus, culot de centrifugation de sérosités patho- 

 logiques, etc), en couche mince, sur lame de verre bien propre, 

 sèche, mais non chauffée. — Sécher par agitation de la lame à l'air; ne 

 pas chauffer; ne pas fixer. 



Délimiter la surface à colorer par un trait au crayon gras. — Faire 

 tomber sur elle X à XII bonnes gouttes du colorant puisé à l'aide d'une 

 pipette ne servant qu'à cette coloration. — Étaler le colorant sur tout le 

 frottis par des mouvements de roulis de la lame. — Déposer la lame à 

 plat et laisser agir 3 minutes (pendant ce temps, la préparation se fixe 

 et commence à se colorer, comme dans le procédé de Leishman). 



Reprendre la lame et, en l'inclinantlégèrement, rassembler le colorant 

 le long d'un de ses grands J^ords; ajouter, avec la même pipette (ou 

 une autre identique) autant de gouttes d'eau distillée qu'on a employé 

 de gouttes du colorant (1) (ce qui, en volume, fait environ trois fois plus 

 d'eau que de colorant alcoolique). — Provoquer ra/j-irfemeni, par quelques 

 mouvements de roulis de la lame, le mélange de l'eau et du colorant, 

 et l'étalement de la dilution sur toute la surface à colorer. — Aussitôt ce 

 résultat acquis, cesser d'agiter; déposer de nouveau la lame horizon- 

 talement, et n'y plus toucher jusqu'à ce que la coloration soit achevée, 

 car, en la remuant, on activerait la formation de précipités nuisibles au 

 résullat.En moyenne, laisser agir 8 à 10 minutes sur du sang ordinaire, 

 10 à 15 minutes sur du sang parasité (hématozoaires, trypanosomes, etc.), 

 20 à 23 minutes sur du suc d'ulcérations syphilitiques. 



(1) Les colorations semblent encore plus fouillées si on additionne l'eau 

 de dilution, au moment de s'en servir, de II ou III gouttes de colorant neuf; 

 mais cette complication n'est pas nécessaire. 



