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cosée, car alors la culture se fait bien dans toute la hauteur des tubes 

 et ne s'étale pas en surface. 

 Voici la technique que nous employons : 



Préparation du milieu. — A 500 ce. de macération de viande de 

 veau (2o0 grammes de viande hachée pour 500 ce. d'eau), mélangée 

 avec partie égale de bouillon de panse (peptone Martin), on ajoute par 

 litre du mélange : 



Gélose 8 grammes. 



Glucose 15 — 



Nitrate de potasse 2 — 



Faire dissoudre et ajouter un blanc d'œuf ; chauffera 115" pendant 

 une demi-heure ; filtrer ; répartir dans des tubes à essais stériles sur 10 

 à 12 centimètres de hauteur ; stériliser en chauffant une demi-heure 

 à 100°, pendant trois jours de suite ou bien une demi-heure à 115°. 



Technique de l'examen. -, — Il est indispensable de partir d'une colonie 

 pure. Toucher la colonie avec un petit crochet de verre et diluer dans 

 un tube contenant 10 ce de bouillon stérile, la très petite quantité 

 prélevée en l'écrasant le long de la paroi du tube. Agiter le tube pour 

 bien répartir les microbes. Faire fondre la gélose d'un tube de Veillon 

 dans l'eau en ébullition, refroidir rapidement à 50°. Prélever avec une 

 pipette stérile i ce du bouillon contenant la dilution du bacille diphté- 

 rique et le répartir dans toute la hauteur du tube de gélose en mélan- 

 geant soigneusement. Refroidir le tube de gélose et mettre à l'étuve. 



Souvent après quinze heures, si on a ensemencé un bacille diphté- 

 rique provenant d'une angine à fausse membrane, on constate un semis 

 abondant de colonies, uniformément réparties sur toute la hauteur du 

 tube, sans prédominance dans la zone d'aérobiose. Retirés de l'étuve et 

 conservés à la température de la chambre, pendant plusieurs jours, ces 

 tubes ne montrent pas de changement appréciable, les colonies les plus 

 voisines de la surface de la gélose ne se sont pas étalées à Vair libre. 



Si on procède de même avec des bacilles de Hoffmann, on voit qu'ils 

 ne poussent qu'en une zone voisine de la surface, la culture est moins 

 rapide qu'avec le bacille diphtérique, elle est ordinairement visible 

 après vingt-quatre heures, toujours après trente-six heures ; les colonies 

 sont localisées dans le dernier centimètre de la gélose, près de la sur- 

 face et fréquemment les colonies sont plus nombreuses dans une zone 

 de 2 à 3 millimètres avoisinant l'air libre, tout le reste du tube est 

 complètement privé de colonies. Les tubes gardés à la température de 

 la chambre montrent au bout de huit à dix jours un développement 

 exubéi^ant des colonies voisines de fair qui envahissent toute la surface 

 libre de la gélose sous forme d'une couche épaisse et crémeuse. 



