Äskulinspaltendes Enzym. 277 



Fällung mit Bleiacetat. Die Intensität der Grünfärbung mit 

 Eisenchlorid ließ auch bei Einhaltung vollkommen gleicher 

 Versuchsbedingungen eine beiläufige Beurteilung der Stärke 

 der erfolgten Äskulinspaltung zu, indem sich die Lösung bei 

 gleicher Menge und gleicher Konzentration der einwirkenden 

 Stoffe je nach der Intensität der erfolgten Äskulinspaltung 

 gelblichgrün, rein hellgrün, grasgrün bis intensiv dunkelgrün 

 färbte. Durch wiederholtes Umkrystallisieren konnten aus der 

 äskuletinhältigen Lösung feine, glänzende Nadeln dargestellt 

 werden, deren Identität mit Äskuletin durch die oben genannten 

 Reaktionen festgestellt werden konnte, außerdem wurde auch 

 zur Kontrolle die Bestimmung des Schmelzpunktes heran- 

 gezogen. 



Das zuerst erhaltene Filtrat wurde auf dem Wasserbade 

 verdunstet, der Rückstand mit heißem Alkohol behandelt, wobei 

 das Enzym ungelöst blieb, während die eventuellen Spaltungs- 

 produkte des Äskulins, das Äskuletin und die Glukose, in 

 Lösung gingen; ein Teil der Glukose blieb, da in Alkohol 

 schwer löslich, im Rückstande und wurde daraus durch Wasser 

 extrahiert. Nach dem Filtrieren wurde das Filtrat abermals auf 

 dem Wasserbad verdunstet und der Rückstand mit wenig 

 kaltem Wasser behandelt, wodurch eine wenn auch unvoll- 

 ständige Trennung des Äskuletins von der Glukose bewirkt 

 wurde, indem neben der Glukose auch ein geringer Teil des 

 Äskuletins in Lösung ging, der größere Teil blieb aber auf dem 

 Filter zurück; dieser wurde mit Alkohol behandelt und die 

 Lösung auf Äskuletin untersucht. 



Im Filtrat wurde nach den gebräuchlichen Methoden, wo- 

 bei insbesondere die Trommer'sche in Anwendnng kam, auf 

 Glukose geprüft. Bei einer stattgefundenen Äskulinspaltung 

 färbte sich die Flüssigkeit auf Zusatz von Natronlauge intensiv 

 gelb infolge des in der Lösung gleichzeitig enthaltenen Äsku- 

 letins; bei dem Kontrollversuch mit dem gekochten Enzym trat 

 diese intensive Gelbfärbung nicht auf, die betreffende Flüssigkeit 

 färbte sich nur hell strohgelb, bedingt durch das unzersetzte 

 Äskulin; auch die anderen Reaktionen auf Äskuletin ergaben 

 bei den Versuchen mit dem gekochten Enzym ein negatives 

 Resultat. Auch die Reaktion auf Glukose lieferte bei den Ver- 



