284 W. Sigmund, 



Das fettspaltende Enzym. 



In den Samen der Roßkastanie wurde eine Lipase nach- 

 gewiesen, jedoch nur in den Cotyledonen, denn, wie die auch 

 getrennt, d. h. mit den Samenschalen allein und mit den Coty- 

 ledonen für sich ausgeführten Versuche ergaben, fand eine 

 Spaltung des zugesetzten Fettes nur bei den Versuchen mit den 

 Cotyledonen statt, nicht aber bei den Versuchen mit den 

 Samenschalen. Ebenso ergaben auch die Versuche mit der 

 Rinde und den Blättern keine Fettspaltung. 



Als Versuchsfett wurde Olivenöl benützt, welches mit dem 

 Organbrei, mit dem wässerigen Extrakt oder mit dem isolierten 

 enzymhaltigen Körper, im letzteren Fall unter Zusatz von etwas 

 Wasser, zu einer Emulsion vermischt wurde; als Antiseptikum 

 wurde Toluol, meist aber Chloroform verwendet; die Versuchs- 

 temperatur war wie bei den bisherigen Versuchen 30° C. 



Um die enzymatische Fettspaltung sicherzustellen, wurde 

 jeder Versuch doppelt ausgeführt, mit dem normalen und mit 

 dem gekochten enzymhaltigen Körper. Nach Ablauf der Ver- 

 suchsdauer wurde der Inhalt des Versuchsgefäßes mit der 

 fünffachen Menge Alkohol geschüttelt, mit einigen Tropfen 

 alkoholischer Phenolphthaleinlösung als Indikator versetzt und 

 mit Vio-Normalnatronlauge unter wiederholtem Schütteln bis 

 zur bleibenden Rosafärbung titriert. Da jeder Parallelversuch 

 unter den vollkommen gleichen Versuchsbedingungen aus- 

 geführt wurde, so ergab die Differenz in der verbrauchten 

 Menge Vio-Normalnatronlauge zwischen dem Versuch mit dem 

 aktiven und mit dem gekochten Enzym die Menge der enzy- 

 matisch gespaltenen Fettsäure. 



Die Versuche mit den Roßkastaniensamen, sowohl die mit 

 den Extrakten als auch die mit dem isolierten Enzym, ergaben 

 je nach der Menge des enzymhaltigen Körpers und je nach der 

 Versuchsdauer durchwegs eine mehr oder minder erhebliche 

 Differenz. So betrug z. B. bei Einwirkung von je 0'2g des aus 

 den Roßkastaniensamen isolierten Enzyms und je 4cm 3 Wasser 

 unter Zusatz von gleichen Mengen Chloroform auf je 2' 7g 

 Olivenöl nach 5 Tagen die Differenz zwischen aktivem und 



