RICERCHE SUL CONTENUTO COLESTEARINICO DEL SANGUE CIRCOLANTE ECC. 123 



portuno di adottare, con qualche lieve modificazione, la tecnica suggerita 

 di Icovesco, la quale del resto non è che una derivazione diretta del 

 metodo di Kumagawa e Sdto. 



Secondo questa tecnica si saponifica il siero con una determinata 

 quantità di soda caustica pura, proporzionata al peso dello siero, per un 

 determinato tempo, si estrae quindi con etere, si acidifica quindi il siero 

 saponificato ed estratto con etere, si estrae nuovamente con etere e 

 si essicca riprendendo il residuo secco con etere di petrolio, aggiungendo 

 poscia in determinate proporzioni alcool assoluto potassico al quinto 

 normale. Si completa la saponificazione degli acidi grassi, si aggiunge 

 acqua distillata e si agita: i saponi rimangono così in soluzione nel- 

 l'acqua alcolizzata e tutta la colesterina viene a trovarsi nell'etere di 

 petrolio. Si decanta infine e si evapora raccogliendo così la colesterina 

 che deve quindi essere purificata per venire esattamente dosata. 



Per il dosaggio abbiamo preferito ai metodi coloriinetrici (che hanno 

 il vantaggio su quelli per pesata di una maggiore comodità e rapidità, 

 e quindi trovano meglio la loro applicazione in ricerche cliniche) quello 

 di Windads che è stato in questi ultimi anni largamente adoperato. 



Il metodo di Windaus si fonda sul principio che la colesterina forma 

 con la digitonirta una combinazione definita cristallina, insolubile a tem- 

 peratura ordinaria in alcool a 95° ed etere, combinazione che non è 

 affatto influenzata dalla contemporanea presenza di acidi grassi. Dal peso 

 del composto digitocolesterico si calcola la quantità di colesterina co- 

 noscendo che la colesterina corrisponde in peso a 0, 2431 di detto 

 composto. 



Non sempre però abbiamo praticato il dosaggio con la digitonina, 

 perchè a volte non è possibile di ottenerlo dalla casa Merk per la dif- 

 ficoltà di preparazione di questo glucoside: pertanto in quelli dei nostri 

 esperimenti nei quali non abbiamo applicato il metodo di Windads, ci 

 limitiamo a dare soltanto le cifre corrispondenti alla pesata del prodotto 

 dopo la semplice estrazione, facendo menzione in questi casi in cui l'a- 

 nalisi non fu completa, del modo di presentarsi del prodotto dopo la 

 semplice estrazione, quale risulta dai protocolli di esperienza, per quanto 

 questo criterio possa essere indice della purezza del prodotto stesso. 



Per evitare errori o, a dir meglio, per controllare volta a volta l'e- 

 sperienza, nelle prime prove abbiamo fatto con lo stesso materiale due 

 analisi. In seguito però visto che i risultati erano perfettamente con- 

 cordanti, ci siamo limitati, anche per risparmio di tempo, ad una sola. 



