(13) séance du 9 juin 253 



Procédé de caractérisation spécifique 



DE LA MATIÈRE COLORANTE DU SANG DANS l'uRINE, 



par Georges Fontes. 



Ce procédé est basé sur les faits suivants : i° en milieu acide, 

 l'hémoglobine se transforme en hématine ; 2° l'alcool amylique 

 est capable d'extraire l'hématine de sa solution dans un liquide 

 aqueux acidulé ; 3° les réducteurs, en présence d'ammoniaque 

 ou de corps possédant le groupement NFP ou encore de pyri- 

 dine, transforment l'hématine en hémochromogène. Ce dernier 

 pigment possède une couleur rouge-fraise très intense et présente 

 2 bandes d'absorption dont les milieux sont respectivement à 

 l 56o et à ?^ 53o. La première de ces bandes est d'une netteté 

 toujours très considérable. Couleur et spectre font de l'hémo- 

 chromogène le pigment le plus facile à caractériser parmi les 

 dérivés ferrugineux de l'hémoglobine. 



Le premier et le troisième faits sur lesquels s'appuie le procédé 

 sont d'acquisition ancienne et couramment employés. Le second 

 fait, à ma connaissance, n'avait pas encore été signalé. 



Pour rechercher et caractériser la matière colorante du sang 

 dans l'urine, on opérera de la façon suivante : dans une boule à 

 décantation de 200 ce. de capacité, introduire environ 100 c.c. 

 d'urine et i5 c.c. d'un mélange, à parties égales, d'alcool amy- 

 lique et d'acide acétique cristallisable. Agiter violemment. Lais- 

 ser ensuite reposer quelques minutes. L'alcool amylique, peu 

 soluble dans l'urine, se sépare, à la partie supérieure, en entraî- 

 nant l'hématine, un peu d'acide acétique et d'autres pigments 

 normaux ou anormaux de l'urine. Décanter la couche supérieure 

 amylique et la recevoir sur un entonnoir muni d'un filtre à plis. 

 L'alcool amylique, fortement émulsionné, ne filtre pas. Par 

 contre, un peu d'urine mécaniquement entraînée passe à tra- 

 vers le filtre. Rejeter tout ce qui s'écoule ainsi. Faire alors cou- 

 ler sur le filtre i à 2 c.c. d'alcool éthylique à 95°. Cet alcool 

 détruit l'émulsion et l'hématine filtre claire, cependant que sont 

 retenues certaines substances (d'origine probablement albumi- 

 noïde précipitées par l'acide acétique et entraînées mécanique- 

 ment) qui gêneraient l'examen spectroscopique ultérieur. Re- 

 cueillir dans un tube à essais cette solution d 'hématine presque 

 incolore. Ajouter alors environ 5 c.c. d'ammoniaque concentrée 

 tenant en dissolution une pincée d'hydrosulfîte de soude. Bou- 

 cher le tube avec le doigt et le renverser 2-3 fois sur lui-même, 

 sans agiter. L'hématine se transforme en hémochromogène et 

 l'ensemble du tube prend une teinte rouge-fraise plus ou moins 

 Biologie, Comptes rendus. — 1922. T. LXXXVII. 18 



